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5XFAD

時間：2017/2/13閱讀：7207

5XFAD小鼠基因檢測報告-2016.9.7

動物品系： 5XFAD 小鼠操作日期：2016.9.5-2016.9.7

1.主要試劑

注：實驗中用到的試劑在備注項打“√”，沒有用到的試劑打“—”，與列表不一致的試劑在備注中說明。

2.主要儀器：

注：實驗中用到的儀器在備注項打“√”，沒有用到打“—”，與列表不一致的在備注中說明。

3.PCR操作步驟

4. PCR反應(yīng)條件

94 ℃ 3 min；

94 ℃ 30 sec， 54 ℃ 60 sec，72 ℃ 60 sec 35×；

72 ℃ 5 min；

5. 1%瓊脂糖凝膠電泳體系

稱取 1.6 （1.6g）瓊脂糖加入 100 （100ml）TAE緩沖液中混勻，微波爐加熱兩次沸騰后加7μl染液，混勻，倒入板中凝固。凝固后每孔加入15μl樣本，每行*孔加入5μl Marker。進(jìn)行凝膠電泳。

6. 拍圖

完成的凝膠電泳經(jīng)過凝膠成像系統(tǒng)拍圖得出結(jié)果

7. 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

引物名稱	序列（5’→3’）	PCR產(chǎn)物大小
上游引物oIMR 3610	AGGACTGACCACTCGACCAG	377bp
下游引物oIMR 3611	CGGGGGTCTAGTTCTGCAT	377bp
上游引物oIMR1644	AATAGAGAACGGCAGGAGCA	608bp
下游引物oIMR 1645	GCCATGAGGGCACTAATCAT	608bp
陽性內(nèi)標(biāo)oIMR7338	CTAGGCCACAGAATTGAAAGATCT	324bp
陽性內(nèi)標(biāo)oIMR7339	GTAGGTGGAAATTCTAGCATCATCC	324bp

8. 結(jié)果判定

根據(jù)成像結(jié)果及判定標(biāo)準(zhǔn)，陽性動物編號如下：共計16只

8566、 8582、8584、8573、8586、8588、8577、8590、

8591、 8592、8543、8593、8546、8547、8595、8596

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