紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)不穩(wěn)定時(shí)檢查的方法有以下幾種:
①電源是否穩(wěn)定 因?yàn)楣庾V儀器的不穩(wěn)定,90%以上是電源引起的。氘燈恒流源(300mA)若波動(dòng)1%,則發(fā)出的光通量波動(dòng)6.7%;鎢燈橫壓源(12V)若波動(dòng)1%,則發(fā)出的光通量波動(dòng)3. 4%。所以電源的穩(wěn)定性非常重要。紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的電源很多,有交流供電電源(即市電電源)、光源電源、光電倍增管直流高壓電源、放大器的工作電源等。每一種電源都會(huì)直接影響儀器的穩(wěn)定性。當(dāng)儀器出現(xiàn)不穩(wěn)定時(shí),應(yīng)該根據(jù)有關(guān)測(cè)試方法,認(rèn)真檢查、測(cè)試,保證各電源的指標(biāo)符合要求。
②試樣是否被光解 由于紫外光照射到樣品上時(shí),有些樣品會(huì)發(fā)生光化學(xué)反應(yīng)(光解),使樣品濃度變化,造成測(cè)試數(shù)據(jù)的不穩(wěn)定。如酞丁胺、維生素B12等。
③測(cè)試波長(zhǎng)選擇是否合適 因?yàn)椴煌牟ㄩL(zhǎng)時(shí),其摩爾吸光系數(shù);£)不同;而不同的摩爾吸光系數(shù)時(shí),;測(cè)試靈敏度不同;當(dāng)選擇的測(cè)試波長(zhǎng)不是佳波長(zhǎng)時(shí),可能會(huì)因?yàn)樾盘?hào)不同(有時(shí)信號(hào)太弱),產(chǎn)生波動(dòng)。所以,要選擇大波長(zhǎng)作為測(cè)試波長(zhǎng)。
④周?chē)h(huán)境是否有干擾 當(dāng)儀器不穩(wěn)定時(shí),要認(rèn)真查看周?chē)袩o(wú)電場(chǎng)、磁場(chǎng)的干擾;是否有振動(dòng)源存在(周?chē)绻酗w機(jī)起飛和降落,也會(huì)引起紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的不穩(wěn)定)。
⑤溶劑是否揮發(fā) 由于溶劑揮發(fā),會(huì)使試樣濃度不斷變化,致使測(cè)試結(jié)果不穩(wěn)定(數(shù)據(jù)偏高)。這時(shí),一方面要采取保護(hù)溶劑不被揮發(fā)的措施,另一方面盡量選擇不揮發(fā)的溶劑。
⑥雜質(zhì)引起的不穩(wěn)定 由于試樣中有雜質(zhì)的存在,而有些雜質(zhì)本身又不穩(wěn)定(容易光解或容易揮發(fā)),所以會(huì)使測(cè)試結(jié)果不穩(wěn)定。有時(shí)會(huì)出現(xiàn)雜質(zhì)峰,干擾主要的測(cè)試峰。