NobleRyder  CLO01-20KU  DNA連接酶  T4 DNA ligase（Rapid）  20KU

產(chǎn)品品牌：NobleRyder

產(chǎn)品貨號：CLO01-20KU

產(chǎn)品名稱：DNA連接酶

英文名稱：T4 DNA ligase（Rapid）

產(chǎn)品規(guī)格：20KU

 NobleRyder  DNA連接酶

產(chǎn)品內(nèi)容：

產(chǎn)品簡介

T4 DNA Ligase是從表達T4 DNA連接酶基因的大腸桿菌中純化而來，可催化雙鏈DNA或RNA上的5'-磷酸末端和3'-羥基末端形成磷酸二酯鍵。該酶不僅能夠催化粘性末端或平末端之間的連接，還可以修復(fù)雙鏈DNA、RNA或DNA/RNA 雜交雙鏈中的單鏈切口。

活性定義

在20μL的連接反應(yīng)體系中，6μg的λDNA-HindⅢ分解物在16℃下反應(yīng)30 min時，催化50%以上的DNA片段發(fā)生連接所需要的酶量定義為1個活性單位(U)。

注意事項

1. 請于使用前確保產(chǎn)品wan全解凍，che底混勻后短暫離心，置于冰上備用。

2. T4 DNA Ligase 不穩(wěn)定，使用時冰上操作，用完立即放回-20℃。

3. 反復(fù)凍融會影響產(chǎn)品的性能。

4. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

實驗方法

1.DNA片段與載體連接（粘性末端連接）

①冰上配制連接反應(yīng)體系：

②反應(yīng)條件：

25 ℃反應(yīng)10 min。

2.DNA片段與載體連接（平末端連接）

①冰上配制連接反應(yīng)體系：

* 平末端載體與片段進行連接時，應(yīng)首先將載體進行去磷酸化處理，防止其自身環(huán)化。

②反應(yīng)條件：

25 ℃反應(yīng)1 h或16 ℃過夜。

3. DNA 文庫構(gòu)建中接頭連接反應(yīng)

①冰上配制連接反應(yīng)體系：T4 DNA Ligase (400U/μL)

②反應(yīng)條件：

25 ℃反應(yīng)10 min。

如需失活T4 DNA Ligase在 65℃反應(yīng)10 min 或者 70℃反應(yīng) 5 min。

產(chǎn)品訂購信息：

NobleRyder  CLO01-20KU  DNA連接酶  T4 DNA ligase（Rapid）  20KU

NobleRyder  CLO01-80KU  DNA連接酶  T4 DNA ligase（Rapid）  80KU

 NobleRyder  DNA連接酶