DNA產物純化試劑盒 NobleRyder D0911
【簡單介紹】
【詳細說明】
DNA產物純化試劑盒 NobleRyder D0911
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DNA產物純化試劑盒 NobleRyder D0911
DNA純化試劑盒
試劑盒組成 | 100T | 400T | 保存溫度 |
結合液 | 25ml | 100ml | RT |
玻璃奶 | 5ml | 20ml | RT |
TE緩沖液 | 10ml | 30ml | RT |
原理簡介
本試劑盒利用*的緩沖液,可從PCR產物,連接產物,酶切產物等溶液中回收較大DNA片段,同時除去其它蛋白、無機鹽及寡核苷酸引物等雜質。
對于50ul的含DNA樣品,本試劑盒(以100T為例)可用100次。對于更小體積的樣品,本試劑盒使用次數更多。如果一次純化1ml樣品,本試劑盒(以100T為例)可用5次。
注意事項
1、回收<200bp DNA片段時,應加大結合液的體積(如8倍體積或者更高)。
2、玻璃奶的多少決定吸附能力的大小,對于核酸含量低的樣品,可適當減少加入量,同時減少加入洗脫液的量(TE緩沖液)。
3、如非指明,所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。
操作步驟
1.將含有DAN的樣品離心,取上清轉移到一新的離心管中(如無沉淀,可省去此步)。
2.向溶液中加入5倍體積結合液(如為小片段,可加入8倍體積或者更高體積)混勻。正常情況應該為淡黃色,如溶液變紅,請加入不超過1/10體積的3M 乙酸鈉 PH5.2。
3.玻璃奶混勻。取50ul混勻的玻璃奶加入上面溶解的溶膠液中,混勻(如DNA含量過低,可減少玻璃奶加入量,如只加入20ul)。
4.室溫放置2-3分鐘。期間可翻轉混勻1-2次。
5.10000轉/分鐘離心1分鐘,去上清;沉淀加入1ml 70%乙醇,振蕩混勻,10000轉/分鐘離心1分鐘,去上清,70%乙醇重復洗一次,再用無水乙醇洗一次。去上清,再次離心2分鐘,用小吸頭吸去上清(70%乙醇洗兩次,無水乙醇洗一次)。
6.室溫放置10分鐘,加入50ul左右TE緩沖液混勻溶解,50-55℃水浴5分鐘。離心,取上清轉移到一新的離心管中。此為所提質粒。
7.電泳或者其他方法檢測,進入下游實驗。
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