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小鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒
【簡單介紹】
上海士鋒生物專業經營合成訂制、培養基、生化試劑、進口ELISA試劑盒、化工產品、原料藥、實驗室消耗品、實驗室耗材以及實驗室器材。產品涉及分子生物學、細胞生物學、細菌學、遺傳學、免疫學、生物化學、蛋白質學、細胞治療等領域。
【詳細說明】
小鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒 全國各地現貨供應
英文名稱:Mouse granzymes A,Gzms-A ELISA Kit
供 應 商:IBL,DRG ,R&D,HCB
上海士鋒生物傾力為客戶提供上萬種科研試劑,提供*、zui全、zui有效的科研試劑產品,質量被全國各大院校科研機構認可。咨詢!同時代理IBL,DRG ,R&D,HCB等品牌*試劑盒。
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小鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒 樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
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樣本收集與前期準備:
利用ELISA進行臨床檢驗常見的樣本一般包括血液(指血,靜脈血),尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,精液,陰道分泌物等,這些樣本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。
(一) 臨床樣本的收集
A、血液樣本
有些生理因素,如吸煙、進食、運動、情緒波動、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化,有些甚至還有晝夜變化。因此血液標本的采集應盡量避免生理因素干擾,以條件*為宜,如無法避免,應在標本上注明該因素。
1.外周血
一般選取左手無名指內側采血,該部位應無凍瘡,炎癥,水腫,破損。如該部位不符合要求,以其他手指部位代替。對燒傷病人,可選擇皮膚完整處采血。由于部分血液常規檢測(如白細胞計數、分類等)受生理因素影響波動過大,比較時宜使條件盡量*。涉及到體內出、凝血功能的檢測項目(如血小板計數,出血時間或凝血時間等)的檢測,一定要注意了解患者是否用過抗凝、促凝藥物,以便在減少或避免干擾因素的影響。
2.靜脈血
除涉及各種止血和血栓檢測等項目需采用抗凝靜脈血血漿外,目前絕大多數檢測項目的分析檢測可直接采用靜脈血的血清。在血清檢測項目中,有些(如血糖,血脂等)受飲食及晝夜因素影響較大,一般以清晨空腹血標本為宜;有些在血中衰變較快(血清酶活性測定如ACP活性等),0~4℃貯存活性減弱也不一,這些項目的檢測必須及時而快速;有些(如肌酸激酶等)受運動等因素影響較大。抽血時避免溶血的發生也十分重要,尤其涉及血鉀,LDH等的測定。
B、尿液樣本
同血標本一樣,尿液標本受飲食、運動、藥物量等因素的影響也較大,特別是飲食的影響,故一般來說晨尿優于隨機尿。晨尿是指清晨起床后的*次尿標本,較濃縮和酸化,有形成分(如血細胞,上皮細胞,管形)相對集中便于觀察。隨機尿即隨意一次尿,留取方便,但受飲食、運動、藥物影響較甚,易于出現假陽性和假陰性結果,如飲食性蛋白尿,飲食性糖尿,維生素C干擾潛血結果等。餐后尿(午餐后2小時收集的患者尿液)適用于尿糖,尿蛋白和尿膽原的檢查,此時的尿標本可增加試驗敏感性,檢出較輕微的病變。12小時尿細胞計數即Addis計數(前晚8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液),因時間較長,細菌易繁殖,須加入防腐劑甲醛。24小時尿(*天晨8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液)中化學物質的定量,包括蛋白,糖,尿17-酮、17-羥類固醇,兒茶酚胺,Ca2+等,檢測不同的物質,選擇不同的防腐劑防腐。清潔中段尿多用于尿細菌培養,要求無菌,沖洗外陰后留取標本。所有尿標本的收集都應足量,zui少12 ml,50 ml,定時尿須全部收集,對女性患者應避免陰道分泌物、經血污染尿標本。
C、糞便樣本
糞便標本的檢測對判斷消化系統疾病有重要參考價值。采集時要求用干凈的竹簽選取含有粘液、膿血等異常病變成分的糞便,對外觀無異常的糞便須從表面、深處及糞端多處取材。找寄生蟲蟲體及作蟲卵計數應收集24小時糞便。查痢疾阿米巴滋養體應于排便后立即檢查,從有膿血和稀軟處取材,保溫送檢。查日本血吸蟲蟲卵時應取粘液、膿血部分,孵化毛蚴時至少留取30g糞便,且需盡快處理。檢查蟯蟲卵須用透明薄膜拭子于晚12時或清晨排便前自肛門周圍皺襞處拭取并立即鏡檢。隱血試驗(化學法),試驗前3日禁食肉類及含動物血食物并禁服鐵劑,維生素C等。所有糞便標本采集后1小時內應檢查完畢,以防止有形成分受消化酶及pH的破壞,來不及檢測的,應及時用PBS進行緩沖處理,離心去上清保存。
D、腦脊液樣本
腦脊液標本采集后立即送檢,放置過久將影響檢驗結果:如細胞變性,破壞,導致計數和分類不準;有些化學物質如葡萄糖等將分解含量減少;細菌發生自溶影響細菌的檢出率。腦脊液抽取后一般分裝三個無菌管,*管作細菌培養,第二管作化學分析和免疫學檢查,第三管作一般性狀及顯微鏡檢查,三管的順序不宜顛倒。因標本采集較難,全部送檢和檢測過程應注意安全。
E、胸腹水樣本
與腦脊液標本一樣,采集后的標本注意安全,及時送檢。一般也分裝三管,一管作常規細胞學檢查,一管生化檢查,一管細菌培養,順序以與腦脊液相同為宜。
F、前列腺液樣本
前列腺液標本由前列腺按摩后采集,液量少時直接滴在載玻片上及時送檢,須注意防止標本蒸干,量多時收集在潔凈干燥的試管中。若按摩不出前列腺液,可檢查按摩后的尿液沉渣。
G、精液樣本
精液標本采集前應禁欲3~7天,排凈尿液后可用手淫法或其他方法將精液直接排入干凈的容器中,保溫并及時送檢。由于精子生成日間變動較大,一般應檢查2~3次(每次間隔1~2周)方可做診斷。
H、陰道分泌物樣本
陰道標本采集前24小時應禁止房事、盆浴、陰道檢查、陰道灌洗及局部上藥等,取材所用器械需清潔。一般用鹽水浸濕的棉拭子自陰道深部或陰道穹后部、宮頸管口等處取材,制成生理鹽水涂片后觀察陰道分泌物標本,經期的女性患者不宜檢查陰道分泌物標本。
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(一) 臨床樣本的收集
A、血液樣本
有些生理因素,如吸煙、進食、運動、情緒波動、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化,有些甚至還有晝夜變化。因此血液標本的采集應盡量避免生理因素干擾,以條件*為宜,如無法避免,應在標本上注明該因素。
1.外周血
一般選取左手無名指內側采血,該部位應無凍瘡,炎癥,水腫,破損。如該部位不符合要求,以其他手指部位代替。對燒傷病人,可選擇皮膚完整處采血。由于部分血液常規檢測(如白細胞計數、分類等)受生理因素影響波動過大,比較時宜使條件盡量*。涉及到體內出、凝血功能的檢測項目(如血小板計數,出血時間或凝血時間等)的檢測,一定要注意了解患者是否用過抗凝、促凝藥物,以便在減少或避免干擾因素的影響。
2.靜脈血
除涉及各種止血和血栓檢測等項目需采用抗凝靜脈血血漿外,目前絕大多數檢測項目的分析檢測可直接采用靜脈血的血清。在血清檢測項目中,有些(如血糖,血脂等)受飲食及晝夜因素影響較大,一般以清晨空腹血標本為宜;有些在血中衰變較快(血清酶活性測定如ACP活性等),0~4℃貯存活性減弱也不一,這些項目的檢測必須及時而快速;有些(如肌酸激酶等)受運動等因素影響較大。抽血時避免溶血的發生也十分重要,尤其涉及血鉀,LDH等的測定。
B、尿液樣本
同血標本一樣,尿液標本受飲食、運動、藥物量等因素的影響也較大,特別是飲食的影響,故一般來說晨尿優于隨機尿。晨尿是指清晨起床后的*次尿標本,較濃縮和酸化,有形成分(如血細胞,上皮細胞,管形)相對集中便于觀察。隨機尿即隨意一次尿,留取方便,但受飲食、運動、藥物影響較甚,易于出現假陽性和假陰性結果,如飲食性蛋白尿,飲食性糖尿,維生素C干擾潛血結果等。餐后尿(午餐后2小時收集的患者尿液)適用于尿糖,尿蛋白和尿膽原的檢查,此時的尿標本可增加試驗敏感性,檢出較輕微的病變。12小時尿細胞計數即Addis計數(前晚8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液),因時間較長,細菌易繁殖,須加入防腐劑甲醛。24小時尿(*天晨8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液)中化學物質的定量,包括蛋白,糖,尿17-酮、17-羥類固醇,兒茶酚胺,Ca2+等,檢測不同的物質,選擇不同的防腐劑防腐。清潔中段尿多用于尿細菌培養,要求無菌,沖洗外陰后留取標本。所有尿標本的收集都應足量,zui少12 ml,50 ml,定時尿須全部收集,對女性患者應避免陰道分泌物、經血污染尿標本。
C、糞便樣本
糞便標本的檢測對判斷消化系統疾病有重要參考價值。采集時要求用干凈的竹簽選取含有粘液、膿血等異常病變成分的糞便,對外觀無異常的糞便須從表面、深處及糞端多處取材。找寄生蟲蟲體及作蟲卵計數應收集24小時糞便。查痢疾阿米巴滋養體應于排便后立即檢查,從有膿血和稀軟處取材,保溫送檢。查日本血吸蟲蟲卵時應取粘液、膿血部分,孵化毛蚴時至少留取30g糞便,且需盡快處理。檢查蟯蟲卵須用透明薄膜拭子于晚12時或清晨排便前自肛門周圍皺襞處拭取并立即鏡檢。隱血試驗(化學法),試驗前3日禁食肉類及含動物血食物并禁服鐵劑,維生素C等。所有糞便標本采集后1小時內應檢查完畢,以防止有形成分受消化酶及pH的破壞,來不及檢測的,應及時用PBS進行緩沖處理,離心去上清保存。
D、腦脊液樣本
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G、精液樣本
精液標本采集前應禁欲3~7天,排凈尿液后可用手淫法或其他方法將精液直接排入干凈的容器中,保溫并及時送檢。由于精子生成日間變動較大,一般應檢查2~3次(每次間隔1~2周)方可做診斷。
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