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技術(shù)文章

JM109,DH,BL21感受態(tài)有何區(qū)別

點(diǎn)擊次數(shù):1117 發(fā)布時(shí)間:2016-5-30

1:DH菌株
DH是一種常用于質(zhì)??寺〉木?。E.coli DH在使用pUC系列質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)化時(shí),可與載體編碼的β-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)α-互補(bǔ)??捎糜谒{(lán)白斑篩選鑒別重組菌株。

基因型:F-,φ80dlacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA1

2:BL21(DE3) 菌株

該菌株用于表達(dá)克隆于含有噬菌體T7啟動(dòng)子的表達(dá)載體(如pET系列)的基因。T7噬菌體RNA聚合酶位于λ 噬菌體DE3區(qū),該區(qū)整合于BL21的染色體上。該菌適合表達(dá)非毒性蛋白。

基因型:F-,ompT, hSDS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3)

3:BL21(DE3) pLysS菌株

該菌株含有質(zhì)粒pLysS,因此具有氯霉素抗性。PLysS含有表達(dá)T7溶菌酶的基因,能夠降低目的基因的背景表達(dá)水平,但不干擾目的蛋白的表達(dá)。該菌適合表達(dá)毒性蛋白和非毒性蛋白。

基因型:F-,ompT hsdS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3,pLysS ,Camr

4:JM109菌株

該菌株在使用pUC系列質(zhì)粒載體進(jìn)行DNA轉(zhuǎn)化或用M13 phage載體進(jìn)行轉(zhuǎn)染時(shí),由于載體DNA產(chǎn)生的LacZa多肽和JM09編碼的LacZΔM15進(jìn)行α-互補(bǔ),從而顯示β-半乳糖苷酶活性,由此很容易鑒別重組體菌株

基因型:recA1,endA1,gyrA96,thi-1,hsdR17,supE44,relA1,Δ(lac-proAB)/F’[traD36,proAB+,lacIq,lacZΔM15]

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