補(bǔ)充：如果需要提取的樣品比較多（比如1g），研磨好的樣品在后續(xù)的提取中，需要轉(zhuǎn)移到大的epp管中，研磨時(shí)可以加入較少的抽提液，研磨完畢按照1g樣品10ml提取液補(bǔ)充抽提液，進(jìn)行后續(xù)的操作。
組織研磨儀可在1-3分鐘內(nèi)對硬性、軟性、彈性等樣品進(jìn)行快速有效的干磨或濕磨，亦可達(dá)到對粉體及混濁液混合、均相化的目的，還可以進(jìn)行低溫液氮冷凍研磨，也可以進(jìn)行生物細(xì)胞破碎和DNA/RNA提取。組織研磨機(jī)可研磨的樣品種類包括：植物組織、動(dòng)物組織、細(xì)胞、細(xì)菌、芽孢和酵母等。
組織研磨儀采用上下垂直高速振蕩模式，可快速促進(jìn)細(xì)胞快速破碎、細(xì)胞裂解、組織均勻，使樣品研磨更加均勻；對樣品研磨的重復(fù)性更好，樣品間無交叉污染，節(jié)省時(shí)間和人工成本，是一種效率很高的樣品預(yù)處理設(shè)備。其還具有冷凍組件，可滿足用戶研磨和保存溫度敏感樣品的需求。
組織研磨儀工作原理
組織研磨儀本質(zhì)是二維振動(dòng)球磨儀，是通過振動(dòng)的方式來實(shí)現(xiàn)對樣品的粉碎研磨。研發(fā)生產(chǎn)的組織研磨儀，其工作區(qū)域安裝有兩個(gè)可高頻次振動(dòng)(每分鐘可達(dá)1500次)的搖臂，搖臂形似機(jī)械手，可放置球磨罐或研磨適配器。
設(shè)備工作時(shí)，兩只搖臂作"∞"形運(yùn)動(dòng)，即水平擺動(dòng)，其帶動(dòng)球磨罐內(nèi)部的研磨球，賦予其動(dòng)能，研磨球在容器內(nèi)進(jìn)行高頻次、無規(guī)則的運(yùn)動(dòng)，實(shí)現(xiàn)對樣品的撞擊和擠壓，完成粉碎和研磨。
組織研磨儀詳細(xì)的操作步驟如下：
1、在離心管中加入樣品、研磨球、裂解液（可省），蓋上蓋；
2、將裝好樣品的離心管放入適配器中；
3、將適配器及裝有樣品的離心管浸入液氮中進(jìn)行預(yù)冷凍；
4、將適配器裝到主機(jī)上，鎖緊固定裝置；
5、觀賞防護(hù)罩，按需求設(shè)定好參數(shù)后，開始研磨；
6、等儀器*停止振動(dòng)后關(guān)機(jī)，打開安全門，取出樣品；
7、儀器歸位。
組織研磨儀工藝技術(shù)：
平整度：
工件的平整度取決于磨盤的平整度。隨著加工領(lǐng)域的不斷深化及精度和效率要求越來越高：“WEIANDA"從鑄鐵盤、合成盤、銅盤、純錫盤、樹脂盤發(fā)展到金剛石盤，并通過各種方法把盤的平面訂修到佳達(dá)2um。
粗糙度：
表面粗糙度取決于磨料顆粒的大小、形狀和磨盤的材料， 以及工件材質(zhì)及硬度。
粗磨：
利用較粗顆粒度的磨料在磨盤與工件面上磨削，進(jìn)刀量大、效率高；但磨削面較粗，適用于磨削余量較多之工作。
中磨：
利用中度顆粒的磨料在磨盤與工件面上磨削，進(jìn)刀量快、效率高，表面粗糙度適中，適合磨削量一般之工件。
精磨：
利用較細(xì)顆粒度的磨料在磨盤中與工件面上磨削，進(jìn)刀量較小、表面光潔度好，磨削痕均勻而細(xì)。
軟拋光：
利用磨盤上加裝一個(gè)特殊材料拋光墊或拋光布，拋光料在拋光墊或拋光布之間運(yùn)動(dòng)，使工件比硬拋光更有超鏡子一樣的高光潔度。
硬拋光：
利用合成盤、銅盤、錫盤、樹脂盤等非常高精密度的基面加入微米級金剛石磨料，使工件表面變得既高精密平面度，又有像鏡子一樣的高光潔度。
組織研磨儀的使用方法：
1、將儀器放置在干燥通風(fēng)的環(huán)境中，插上電源，觀察儀器控制顯示器是否正常亮燈。打開儀器，測試控制按鈕是否能正常使用，儀器空載運(yùn)行時(shí)是否有異響。
2、將適量樣品和研磨球放入球磨罐中，預(yù)留一定的研磨空間。初次研磨建議保持樣品和研磨球各占球磨罐容積的三分之一。
3、若需要預(yù)冷凍，可將裝有樣品的球磨罐放入液氮環(huán)境中冷卻3分鐘以上，然后再裝入儀器進(jìn)行研磨。使用液氮進(jìn)行預(yù)冷凍時(shí)，應(yīng)做好防護(hù)措施，防止被凍.傷。
4、將球磨罐放入高通量組織球磨儀的夾具內(nèi)，慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)輪，依靠自動(dòng)定位的緊固裝置固定好球磨罐，蓋上蓋子。
5、在控制顯示器上設(shè)定好研磨儀的運(yùn)行時(shí)間和擺動(dòng)頻次，開始研磨。研磨完成后，轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)輪取下球磨罐。
組織研磨儀可對硬性、中硬性和脆性樣品進(jìn)行細(xì)粉碎和精細(xì)研磨，還適用于軟性、彈性、纖維質(zhì)材料的研磨前處理。既可干磨，也可濕磨，還可進(jìn)行冷凍低溫研磨，在農(nóng)業(yè)、生物醫(yī)藥、食品、地質(zhì)化工、環(huán)境、質(zhì)檢、高校科研等多個(gè)行業(yè)的實(shí)驗(yàn)室都有廣泛應(yīng)用。
一、 實(shí)驗(yàn)試劑：
1.CTAB抽提液：
2%（w/v）CTAB
100 mmol/L Tris-HCl(pH8.0)
20 mmol/L EDTA(pH8.0)
1.4 mol/L NaCl
抽提含多酚較多的植物材料時(shí)（比如木本植物），上述抽提液中可另加入2%的PVP（聚乙烯吡咯烷酮）。
抽提液于室溫保存，可在幾年內(nèi)保持穩(wěn)定。臨用之前向裝有上述抽提液的試管中加入約2%-3%（v/v）的β-巰基乙醇。
2、醋酸鈉：
3 mol/L NaAc
用冰乙酸調(diào)pH值至4.8-5.2。
3、TE溶液：
4、其它：
無水乙醇，異丙醇，75％乙醇，酚：氯仿：異戊醇（25：24：1），氯仿：異戊醇（24：1），β-巰基乙醇，重蒸水。
二、 實(shí)驗(yàn)步驟
1. 樣品研磨
1) 取1g的樣品放入2ml ep管中
2) 加入1-2粒5mm研磨珠
3) 加入1ml的CTAB 抽提液
4) 將加有樣品的ep管放入高通量組織研磨儀的適配器中，蓋好
5) 將研磨轉(zhuǎn)速調(diào)到1800，設(shè)定研磨時(shí)間為90秒（可根椐樣品的研磨的難易程度來調(diào)節(jié)，此數(shù)據(jù)是以銀杏落葉為樣本得出）
6) 啟動(dòng)研磨儀對樣品進(jìn)行研磨（根據(jù)不同的樣品，本身性質(zhì)不同，需要對研磨頻率和研磨時(shí)間進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整）
2. DNA的粗提
1) 將研磨好的樣品取出于65℃水浴45min，中途間隔（輕柔）振蕩三次混勻
2) 冷卻后加入等體積氯仿：異戊醇（24：1），輕柔顛倒混勻使乳化10min
3) 7000g-8000g離心10min（18-20℃）
4) 吸取上清于另一干凈的離心管中
5) （根據(jù)需要可用氯仿：異戊醇如上法重復(fù)抽提一次，吸取上清）
6) 加入與上清液等體積（且已于-20℃預(yù)冷的異丙醇，顛倒混勻，約1至2分鐘后應(yīng)有白色絮狀沉淀出現(xiàn)（若沒有，則加入上清液1/5至1/10體積的pH4.8-5.2的3M NaAc,混勻，于－20℃冰箱中沉淀30min）
7) 離心法沉淀DNA
8) 在75%乙醇中漂洗DNA數(shù)分鐘以上，用Tip頭吸干乙醇
9) 用1ml 75%乙醇再漂洗一次
10) 沉淀于室溫或64℃以下的恒溫箱中干燥片刻至剛出現(xiàn)半透明，不要過度干燥
11) 用50μlTE溶解沉淀，可用65℃水浴助溶，DNA粗提物可用于粗略PCR等。
3. DNA的純化
1) 向TE溶解的DNA粗提物中入4-10μl RNaseA(約40-100μg)
2) 于37℃酶解RNA 1hr或65℃酶解RNA 30min以上
3) 加入50μl酚：氯仿：異戊醇（25：24：1），輕輕顛倒混勻10min
4) 10000g以上常溫離心10min，吸取上清
5) 加入50μl仿氯：異戊醇（24：1）輕輕顛倒10min
6) 10000g以上常溫離心10min，吸取上清 (根據(jù)需要可重復(fù)用氯仿：異戊醇如上法再抽提1-2次，以充分去除蛋白和酚)
7) 向上清中加入1/5-1/10體積的pH4.8-5.2的3M NaAc,并加入2.5倍體積無水乙醇，于－20℃沉淀30min以上
8) 12000g、4℃低溫離心10min,吸干液體
9) 沉淀用75％乙醇漂洗二次
10) 沉淀于室溫或64℃以下恒溫箱中干燥片刻至剛開始出現(xiàn)半透明狀，勿過度干燥加入50μl重蒸水溶解DNA，可于65℃水浴助溶
11) 取5μl DNA電泳檢查DNA的質(zhì)量
12) 100-500倍稀釋后于分光光度計(jì)上測定OD260及OD280，分析DNA的濃度和質(zhì)量
13) 保存DNA于-20℃
補(bǔ)充：如果需要提取的樣品比較多（比如1g），研磨好的樣品在后續(xù)的提取中，需要轉(zhuǎn)移到大的epp管中，研磨時(shí)可以加入較少的抽提液，研磨完畢按照1g樣品10ml提取液補(bǔ)充抽提液，進(jìn)行后續(xù)的操作。
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