納米金偶聯抗體/蛋白試劑盒(20nm,500 μg偶聯量)
產品名稱 | 規格 |
納米金偶聯抗體/蛋白試劑盒 | 納米金(20 nm),偶聯500 μg抗體/蛋白 |
一. 產品簡介
納米金偶聯抗體/蛋白試劑盒可以通過抗體/蛋白上的伯胺基團(如賴氨酸),簡單、快速地實現抗體/蛋白與納米金的共價偶聯。偶聯在30分鐘內即可完成,偶聯效率可達70%左右。此為通用型試劑盒,適用于各種分子量的抗體/蛋白,也適用于多肽、酶等分子。
二. 試劑盒組成與存儲
將試劑盒儲存在-20?C。偶聯劑、反應緩沖液可保存在+4℃或-20℃
試劑盒組成 | 數量 | 保存溫度 |
納米金 (20 nm) | 5 × 20 μg | -20°C |
反應緩沖液 | 5 mL | -20°C / +4°C |
偶聯劑 | 5管 | -20°C / +4°C |
三. 實驗步驟
? 將所有的試劑恢復至室溫。
? 取500 μL反應緩沖溶液加入1管納米金中,得到納米金的分散液;取1管偶聯試劑溶解于200 μL純水中。
? 取100 μg抗體/蛋白加入至上一步的納米金緩沖溶液中,在該混合溶液中,再加入100 μL偶聯試劑,混勻后在室溫下持續30分鐘左右。(注意:偶聯試劑需現配現用!)
? 反應結束后以9500 rpm,離心20分鐘,純水洗滌2~3次以除去未反應完的抗體/蛋白。
? 共軛抗體儲存:標記抗體/蛋白后,我們建議將偶聯物儲存在 +4°C,不要將偶聯物儲存在 -20°C。偶聯物的整體穩定性將由抗體/蛋白本身的穩定性決定,因為它會首先降解。如果您的抗體/蛋白穩定,偶聯物也將穩定。
? 測量偶聯物濃度:納米金(20 nm)的最大吸光度(Absmax)為528 nm。為了確定納米金偶聯物的有效濃度,我們建議在將樣品稀釋到適合您的設備的適當范圍后,使用紫外-可見分光光度計測量Absmax。
四. 注意事項
? 本試劑盒可以兼容無胺緩沖液(PBS, MES, MOPS, HEPES)和 < 50%甘油。若樣品抗體/蛋白中存在以下成分,可能會干擾樣品抗體/蛋白與納米金的偶聯。
緩沖液組成 | 是否兼容 |
無胺緩沖液(如:PBS, MES, MOPS, HEPES) | 是 (pH 6.5-8.5) |
甘油 | 是 (< 50%) |
Gelatin (明膠) | 否 |
Tris | 否 |
Gly | 否 |
羧酸分子(EDTA、檸檬酸等) | 否 |
含伯胺基或巰基分子 (氨基酸、乙醇胺、巰基乙醇或DTT等) | 否 |
血清蛋白 | 否 |
? 若存在以上干擾成分,可先通過超濾管或透析等方式除去干擾成分,再使用本試劑盒將抗體/蛋白與納米金偶聯。
? 最佳偶聯抗體/蛋白量:偶聯抗體/蛋白量將影響每個納米金粒子表面的抗體/蛋白分子數量,最佳偶聯抗體/蛋白量取決于您的應用需求。因此,您可能需要偶聯不同數量的抗體/蛋白,結合應用測試優化得到最佳偶聯抗體/蛋白量。下表顯示了推薦的初始抗體/蛋白量。
納米金質量 | 推薦的初始抗體/蛋白量 |
20 μg | 100 μg |