詳細(xì)介紹
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。?
產(chǎn)品名稱 | 香櫞染料法PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Fructus citri |
貨號(hào) | FS-P99260 |
優(yōu)點(diǎn):
(1)操作簡(jiǎn)單,LAMP核酸擴(kuò)增是在等溫條件下進(jìn)行,對(duì)于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,產(chǎn)物檢測(cè)用肉眼觀察或濁度儀檢測(cè)沉淀濁度即可判斷。對(duì)于RNA的擴(kuò)增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進(jìn)行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器。
(2)快速高效,因?yàn)椴恍枰A(yù)先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時(shí)間損失.核酸擴(kuò)增在l h內(nèi)均可完成,添加環(huán)狀引物后時(shí)間可以節(jié)省1/2,多數(shù)情況在20。30 rain均可檢測(cè)到擴(kuò)增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴(kuò)增至109倍,達(dá)0.5 mg/mL.應(yīng)用專門(mén)的濁度儀可以達(dá)到實(shí)時(shí)定量檢測(cè)。
(3)高特異性,由于是針對(duì)靶序列6個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)的4種特異性引物。6個(gè)區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進(jìn)行核酸擴(kuò)增。故其特異性*。
(4)高靈敏度,對(duì)于病毒擴(kuò)增模板可達(dá)幾個(gè)拷貝,比PCR高出數(shù)量級(jí)的差異。
用途:
1. 方便,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn)。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡(jiǎn)化,能減少污染,降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進(jìn)一步簡(jiǎn)化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見(jiàn)的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進(jìn)行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
ATXN1 失調(diào)癥蛋白1鹽酸可樂(lè)定Zinc hexafluoroacetylacetonate hydrate,Zn(CF3COCHCOCF3)2·XH2OPP2Ac 蛋白磷酸酶4(抗原)
phospho-ATP citrate lyase(Ser455) 磷酸化三磷酸腺檸檬酸裂解酶鹽酸克侖特羅LY335979Runx3 一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因(抗原)
phospho-Ataxin-1(Ser775) 磷酸化失調(diào)癥蛋白1鹽酸芬氟拉明4-氨基-2-溴酚RRAD (Ras-related associated with diabetes ) RRAD(多肽抗原)
AVEN 凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑葉酸4'-乙氧基乙酮SDF-1/CXCL12 (stromal cell derived factor-1) 基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(抗原)
Kir6.2 ATP敏感性通道亞基kir6.2熒光母素4'-乙氧基乙酮shank1(SH3 and multiple anleyrin repead domins protein 1) shank1多肽抗原
AVPR2 精氨酸加壓素受體2左炔諾孕酮L-谷氨酸-γ-芐酯slc22A17 (solute carrier famili 22) 溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族22成員17(多肽抗原)
Bdkrb2/B2R 緩激肽B2受體膽紅素L-谷氨酸-γ-芐酯SLC24A5 (solute carrier family 24, member 5) 可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC24A5(抗原)
Axin1 軸蛋白1膽酸L-谷氨酸-γ-芐酯solute carrier family 1 溶質(zhì)攜帶物家族-1(抗原)
卡因和調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄蛋白鄰氟甲酰氯Porcine FABP5 (Fatty Acid Binding Protein 5, Epidermal ) 檢測(cè)試劑盒
富半胱氨酸肝素結(jié)合蛋白613-氟吡啶-4-羧酸Porcine GIF (Gastric Irinsic Factor) 檢測(cè)試劑盒
2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框653-氟吡啶-4-羧酸Porcine DHEA-S (Dehydroepiandrosterone Sulfate) 檢測(cè)試劑盒
β連環(huán)蛋白樣蛋白12-氟-3-吡啶羧酸Porcine LDHB (Lactate Dehydrogenase B) 檢測(cè)試劑盒
陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)控樣蛋白12-氟-3-吡啶羧酸Porcine D-LDH (D-Lactate Dehydrogenase) 檢測(cè)試劑盒
DNA斷裂因子相似蛋白A2-氟-3-吡啶羧酸Porcine ASB (Arylsulfatase B) 檢測(cè)試劑盒
DNA斷裂因子相似蛋白B4-氯-3,5-二硝基三氟甲Porcine TPA (Tissue Polypeptide Aigen) 檢測(cè)試劑盒
順氯氨鉑耐藥相關(guān)蛋白94-氯-3,5-二硝基三氟甲Porcine FcαR/CD89 (Receptor I for the Fc Fragme of IgA) 檢測(cè)試劑盒
香櫞染料法PCR鑒定試劑盒羅漢果皂苷ⅢePD-L1 (Extracellular Domain Specific) (D8T4X) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 594 Conjugate)
羅漢果黃素Phospho-TAZ (Ser89) (E1X9C) Rabbit mAb
紫草呋喃AHIF-2α (D6T8V) Rabbit mAb
白皮杉,3'-羥基白藜蘆;比杉特(標(biāo)準(zhǔn)品)c-Myb (D1B9E) Rabbit mAb
氯化琥珀酰膽堿Anti-mouse IgG (H+L) F(ab')2 Fragment (PE Conjugate)
氯化琥珀酰膽堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Nur77 (D63C5) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)
多根KIR2DL3 (D8L3D) Rabbit mAb
氯化鎂Urea
苜蓿素(標(biāo)準(zhǔn)品)B-Raf (D9T6S) Rabbit mAb (Biotinylated)
人參皂苷Rg5Dectin-1 (E1X3Z) Rabbit mAb