詳細介紹
原代細胞培養:
原代細胞(Primary cells):是指直接從機體取出的組織或細胞獲得單個細胞并在體外進行培養的細胞。這里的組織主要指:組織器官、外周血及胚胎等。
原代細胞培養:由于原代細胞生長緩慢,繁殖一定的代數停止生長(一般10代以內)。所以一般認為:培養的原代的第1和傳代到第10代以內的細胞統稱為原代細胞培養。
公司產品僅供科研研究實驗
一、細胞基本屬性 | |
細胞名稱 | 小鼠腮腺細胞 |
組織來源 | 腮腺組織 |
商品貨號 | A01X1866 |
種屬來源 | 小鼠 |
產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
細胞簡介 | 小鼠腮腺細胞分離自腮腺組織;腮腺是哺乳類動物口腔中位于下頜角處的大唾液腺,位于外耳道的前下方,下頜后窩內及下頜支的深面。腮腺也是某些無尾目動物頸部有毒皮膚腺的聚集體;唾液腺有3對,腮腺、舌下腺和頜下腺,其中大的一對是腮腺。腮腺細胞是高度分化的上皮源性細胞,是一種營養需要復雜、在一般合成培養基中不易生長,體外培養比較困難。目前,DMEM培養液被認為較適于腺細胞的培養。加入一定量的血清更有利于細胞的生長、增殖與分化。另外,接種的細胞密度也是培養成功的關鍵因素之一,尤其是在腺細胞這種單層細胞培養時,接種的細胞總數量和生長基質表面的細胞密度對整個細胞的生長均有影響。 |
包被條件 | |
培養基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
生長特性 | 貼壁 |
細胞形態 | 梭形、多角形 |
傳代特性 | 可傳1-2代左右 |
消化液 | 0.25%胰蛋bai酶 |
培養條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
具體步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養基重懸,置于培養箱培養。
注意事項:
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和技術部溝通。
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