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詳細介紹
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
商品介紹：
測定意義 脂蛋白酯酶是脂肪細胞、心肌細胞、骨骼肌細胞、乳腺細胞及巨噬細胞等實質(zhì)細胞合成的一種酶，可催化甘油三脂水解為脂肪酸和單酸甘油酯，以供組織氧化供能和貯存，并在不同的組織表現(xiàn)出不同的生理意義。 測定原理 脂蛋白酯酶水解4-硝基苯棕櫚酸酯產(chǎn)生4-硝基苯酚，在400nm有特征吸收峰。 自備實驗用品及儀器 天平、冷凍離心機、研缽、水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板。 |
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 100管/48樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321197 |
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照組織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質(zhì)量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集細胞或細菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細胞或細菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
（標準品）英文名： DL-LysineHHLA1蛋白抗體包裝250mg
香蜂草苷(標準品)英文名： DL-Arginine Hydrochloride心肌肌球蛋白重鏈抗體包裝1g
香附（標準品）英文名： L(-)-Carnitine 異質(zhì)性核糖核蛋白M抗體包裝1g
香加皮（標準品）英文名： Levocarnitine;L(-)-Carnitine附睪分泌蛋白4抗體包裝5g
香荊芥（標準品）英文名： L-Glutamic acid monosodium salt hydrate鐵硫簇整合同源物2蛋白抗體包裝1g
香蒲新苷（標準品）英文名： L-Glutamine HIG1區(qū)域家族成員2A抗體包裝250mg
香薷（標準品）英文名： Glutathione (Reduced);GSH結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白抗體包裝25g
香葉木-7-O-葡萄糖苷（標準品）英文名： Glutathione (Reduced)高遷移率族蛋白B4抗體包裝5g
香葉木（標準品）英文名： Glutathione(Oxidized)硫肝糖蛋白1抗體抗體包裝1g
香櫞(枸櫞)（標準品）英文名： DL-Isoleucine叉頭蛋白J1抗體包裝5g
香櫞（標準品）英文名： H-Lys-OH.HCl艾滋病病抗體包裝25g
香紫蘇(標準品)英文名： L-Ornithine monohydrochloride艾滋病病抗體包裝5g
香紫蘇內(nèi)酯(標準品)英文名： L-Aspartic acid艾滋病病抗體包裝1g
襄五脂英文名： L-Aspartic acid結(jié)合珠蛋白相關(guān)蛋白抗體包裝5g
(標準品)英文名： L-Cysteine hydrochloride，anhydrousL-組脫羧抗體包裝100mg
鏈霉菌屬Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR糜蛋白綠原;Chlorogenic acid
孟氏假單胞菌Pseudomonas│mandelii 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品錳超氧化物歧化試劑盒羅漢果苷ⅴ;Mogroside V
球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR鎂依賴性磷1試劑盒龍膽苦苷;Gentiopicroside
脂蛋白酯酶（LPL）測試盒100管/48樣吉氏根瘤 2-氟酸蛋白激AElisa
微球?qū)?/span> 3,5-二-2,4-二氟苯蛋白激G-II型Elisa
小托柄鵝膏 1-甲基-1,2,4-三唑絲蛋白HTRA1Elisa
阿魏側(cè)耳 氨噻肟酸乙酯組織谷氨酰轉(zhuǎn)移Elisa
大腸桿 2,3-二甲基H3N2流感Elisa
巴斯德酵母 2,6-二溴苯血紅蛋白EElisa
彎曲高溫單孢 3,4,6-三噠Ⅰ型血小板反應(yīng)蛋白7A域Elisa
桑莖點霉 N-Cbz-D-絲百白破抗體Elisa
南方異擔子 3-溴-2,4,6-三磺基轉(zhuǎn)移Elisa
煙曲霉 4-溴--氟苯Preptin蛋白Elisa
灰平鏈霉 檸檬酸鋰肉堿脂酰轉(zhuǎn)移1Elisa
枯斑擬盤多毛孢 2,4-二喹唑啉Ⅶ抗體Elisa
食氮嗜異生質(zhì) 3-乙氧基-4-甲氧基苯甲核仁蛋白14Elisa
漢遜德巴酵母 3-溴-4-Ki-67蛋白Elisa
阪崎腸桿 芐氧基乙Ⅲ型膠原α1Elisa
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