化工儀器網
詳細介紹
商品屬性：
產品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產品規格 | 100管/96樣 |
產品貨號 | AS632132 |
商品介紹：
測定意義： GST是一種具有多種生理功能的蛋白質家族，主要存在于細胞質內。GST是體內解毒酶系統的重要組成部分，主要催化各種化學物質及其代謝產物與GSH的巰基共價結合，使親電化合物變為親水物質，易于從膽汁或尿液中排泄，達到將體內各種潛在或具備毒性的物質降解并排出體外的目的。因此，GST在保護細胞免受親電子化合物的損傷中發揮著重要的生物學功能。此外，因為GST具有GSH-Px活性，亦稱為non-Se GSH-Px，具有修復氧化破壞的大分子如DNA、蛋白質等的功能。注意，GST催化的反應減少GSH含量，但是不增加GSSG含量。 測定原理： GST催化GSH與CDNB結合，其結合產物的光吸收峰波長為340nm；通過測定340nm波長處吸光度上升速率，即可計算出GST活性。 自備儀器和用品： 低溫離心機、水浴鍋、可調節移液器、紫外-可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照組織質量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min，調節波長到340 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
CD30分子(CD30)英文名：CD30 ELISA Kit大腦蛋白2抗體包裝1g
CD19分子(CD19)英文名：CD19 ELISA KitB轉錄激活因子抗體包裝250mg
CC趨化因子受體6(CCR-6)英文名：CCR-6 ELISA KitBCL6B抗體包裝5g
cAMP反應元件結合蛋白(CREB)英文名：CREB ELISA KitBAP31蛋白抗體包裝1g
Ca-ATP(Ca-ATPase)英文名：Ca-ATPase ELISA Kit支鏈基轉2抗體包裝1g
B因子(BF)英文名：BF ELISA KitBCL2相關蛋白A1抗體包裝250mg
B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)英文名：Bcl-2 ELISA KitB淋巴瘤蛋白3抗體包裝5g
B細胞淋巴瘤-XL(Bcl-xl)英文名：Bcl-xl ELISA Kit轉錄因子MYB相關蛋白B抗體包裝1g
B細胞活化因子(BAFF)英文名：BAFF ELISA Kit防御β1/Defensin β1抗體包裝25g
BH3結構域凋亡誘導蛋白(Bid)英文名：Bid ELISA KitB活化因子受體抗體包裝5g
Bcl-2相關X蛋白(BAX)英文名：BAX ELISA KitTNF家族B激活因子抗體包裝1g
Apelin 13(AP13)英文名：AP13 ELISA Kit蛇巴曲抗體包裝5g
apelin 12(AP12)英文名：AP12 ELISA Kit大腦蛋白2抗體包裝100g
Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)英文名：Col Ⅳ ELISA Kit程序性死亡配體1抗體包裝25g
Ⅲ型前膠原肽(PⅢP)英文名：PⅢP ELISA KitB7-H4抗體包裝1g
糖還原相關蛋白質抗體促狀腺胚胎因子(TEF)MDM2 antagonist nutlin-3 is a potent inducer of apoptosis.
谷胱甘肽S轉移酶（GST）測試盒100管/96樣微小毛霉 5-溴吡啶-3-（N-乙基）甲酰磷酸化IκB激-αElisa
Rhizobium multihospitium 3,4-二芐磷酸化N-甲基-D-天冬Elisa
Pseudomonas eucalypticola 3,5-二-2,4,6-三氟吡啶磷酸化α-氨基羥甲基惡唑酸Elisa
樹舌1-2 2,5-二溴對苯二甲酸二乙酯磷酸化表皮生長因子受體Elisa
短小芽孢桿 6-三氟甲基-2-氧化磷酸化肌球蛋白輕鏈Elisa
短小芽孢桿 4-氟-2-甲氧基苯酸磷酸化神經絲HElisa
多形環紋炭團 3--2,4,5,6-四氟吡啶磷酸化外信號調節激Elisa
友好戈登氏 ,6-二溴-4-氟苯磷酸化外信號調節激Elisa
瑞士乳桿 三(6,6,7,7,8,8,8-七氟-2,2-二甲基-3,5-辛二酮基)鐠(Ⅲ)[核磁共振位移試劑]磷酸化腺苷酸活化蛋白激Elisa
麥芽糖假絲酵母 十二碳二酸二甲酯磷酸化信號傳導子及轉錄激活子1Elisa
粗糙脈孢 6-乙酸基-7-甲氧基-3H-喹唑啉-4-酮磷酸化信號傳導子及轉錄激活子3Elisa
德夸鏈霉 二十二烷基基化磷酸肌酸激Elisa
禾谷絲核 6-羥基-7-甲氧基喹唑啉-4-酮磷酸烯式酮酸羧激Elisa
兩型蠟蚧 2,3-二甲酯磷脂Elisa
葡萄牙棒孢酵母 4-溴-2,6-二氟甲苯磷脂肌3激Elisa
化工儀器網