詳細(xì)介紹
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
微量法 | 100管/96樣 | AS6321154 |
商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義: ICL(EC4.1.3.1)主要存在于植物和微生物中,油料作物種子在萌發(fā)過程中,通過乙醛酸循環(huán)及其他過程將脂肪轉(zhuǎn)變成碳水化合物。ICL是乙醛酸循環(huán)的關(guān)鍵酶之一。 測(cè)定原理: ICL催化異檸檬酸降解為乙醛酸和琥珀酸,乙醛酸和NADH在LDH的作用下生成乙醇和NAD,NADH在340nm下有特征吸收峰,監(jiān)測(cè)340nm吸光度的減小速率可間接反應(yīng)ICL活性。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水 |
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
當(dāng)歸尾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Chromium(III) potassium sulfate, dodecahydrateFAM102B蛋白抗體包裝5g
當(dāng)歸酰基戈米辛H(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Chromium(III) sulfate, hydrateFAM104B蛋白抗體包裝100g
當(dāng)歸酰基戈米辛O英文名: Chromotrope FB腎癌下調(diào)蛋白1抗體包裝25g
當(dāng)藥苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Chrysophenine8/第八/第八因子相關(guān)抗原抗體包裝5g
當(dāng)藥黃英文名: Cinnamamide胎盤葉受體蛋白2抗體包裝1g
黨參(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Cinnamon oilFAM13B1蛋白抗體包裝5g
黨參炔苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Citral巖藻糖轉(zhuǎn)移8抗體包裝5g
德爾塔林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Citrazinic acid卵泡激結(jié)合蛋白1抗體包裝100g
燈臺(tái)葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Cobalt (II) oxalate相互作用蛋白FHL2抗體包裝25g
燈心草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Concanamycin A脂肪去飽和1抗體包裝5g
燈心草英文名: Copper(I) bromide回腸脂肪結(jié)合蛋白抗體包裝100g
細(xì)辛(燈盞花)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Copper(II) acetate脂肪型脂肪結(jié)合蛋白包裝25g
奧司明(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Copper(II) bromide脂肪酰還原2抗體包裝250mg
地膽草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Copper(II) citrate, hydrate脆性X相關(guān)蛋白樣2抗體包裝50mg
地膚子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Copper(II) hydroxide脂肪酰解2抗體包裝100g
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體試劑盒羥基茜草;Purpurin
死谷芽孢桿菌Bacillus│vallismortis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR神經(jīng)生長(zhǎng)因子前體試劑盒榿木;Alnusone
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%神經(jīng)生長(zhǎng)因子試劑盒喬松;Pinocembrin
異檸檬酸裂解酶(ICL)測(cè)試盒100管/96樣大腸埃希氏桿 Sulforhodamine 101木糖基轉(zhuǎn)移Elisa
解淀粉芽孢桿 Gabapentin HCl巖藻糖糖基轉(zhuǎn)移Elisa
根癌土壤桿 Bradykinin triacetate salt生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白2Elisa
擬枝孢鐮孢 α-內(nèi)啡肽蛋白激活亞基1Elisa
葡萄汁有孢漢遜酵母 NeurotensinEB病核抗原1Elisa
復(fù)輪生小克銀漢霉 Trichostatin AEB病核抗原2Elisa
廣島鏈霉 Ala-Ala-AlaEB病衣殼抗原Elisa
釀酒酵母 α-Melanocyte stimulating hormone轉(zhuǎn)谷氨酰2Elisa
尖孢鐮孢 BRL-54443TM4SF19Elisa
平菇 Laropipran-IGFBP-4Elisa
密歇根棍狀桿標(biāo)記亞種 Gabexate MesylateCT-IGFBP-4Elisa
戊糖片球 WZ811TNFSF10Elisa
Priceomyces sp. 1-Pyrenebutyric hydrazideTRIM55蛋白Elisa
阿姆斯特丹曲霉 Nutlin-3紅胰島受體酪蛋白激Elisa
枯草芽孢桿枯草亞種 URB597二羥基激2Elisa
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。