詳細介紹
商品介紹:
測定意義: α-GAL (EC 3.2.1.22)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,能專一地催化α半乳糖苷鍵的水解,主要參與棉子糖、水蘇糖、蜜二糖和半乳甘露聚糖等半乳糖苷的降解。α-GAL對于植物種子的萌發至關重要,種子萌發初期,其催化產生的D-半乳糖通過糖酵解途徑迅速轉化和消耗,為種子的萌發提供最初的能量來源,后期則主要參與細胞壁儲藏多糖水解。 測定原理: α-GAL分解對-硝基苯-α-D-吡喃半乳糖苷生成對-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算α-GAL活性。 自備用品: 可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
商品屬性:
產品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產品規格 | 100管/48樣 |
產品貨號 | AS6321244 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照組織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照組織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
羚羊角(標準品)英文名: 1,1-Cyclopropanedicarboxylic acid脂肪瘤相關蛋白抗體包裝5g
硫基葡萄糖(標準品)英文名: TAPS層粘連蛋白β4抗體包裝5MG
硫長春質堿(標準品)英文名: LY294002黃體激釋放激/促性腺激釋放激抗體包裝1g
硫黃連堿(標準品)英文名: SHES蛋白賴-6-氧化抗體包裝5g
硫氫小檗堿(標準品)英文名: PHES白酪激受體抗體包裝25g
硫軟骨(標準品)英文名: AHES同源盒轉錄因子LMX1A抗體包裝5g
硫小檗堿(標準品)英文名: HES轉化生長因子β1結合蛋白1抗體包裝25g
柳穿魚黃(標準品)英文名: DIPSO Monosodium狂躁基因同源蛋白MFNG抗體包裝5g
龍膽(堅龍膽)(標準品)英文名: DIPSOE3泛蛋白連接MIB1抗體包裝100g
龍膽(龍膽)(標準品)英文名: DMPS主導控制樣蛋白1抗體包裝25g
龍膽花(標準品)英文名: CHPS-Na主導控制樣蛋白2抗體包裝500g
龍膽苦苷(標準品)英文名: Sodium 2-bromoethanesulphonate絲裂原活化蛋白激6抗體包裝100g
龍膽;2,5-二羥基(標準品)英文名: BICINE磷化絲/蘇蛋白激MST4,MST3,STK25抗體包裝25g
龍脷葉(標準品)英文名: BES Sodium Salt表皮生長因子樣蛋白Megf10抗體包裝1g
龍腦(標準品)英文名: BES free acidMPP4蛋白抗體包裝5g
結核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質量規格:99%,santa原裝sc-203765抗磷脂酰甘油抗體試劑盒β,β’-二基烯酰阿寧;β, β-
中國動性微菌Planomicrobium│chinense 質量規格:>98%,BR抗磷脂酰甘油抗體試劑盒3,29-二酰基栝樓仁三;3,29
根瘤菌Rhizobium│sp. 質量規格:>98%,BR培養級抗磷脂酰抗體試劑盒二羥E;Coronarin E
α半乳糖苷酶(αGAL)測試盒100管/48樣豬丹絲 1,4-二-2,5-二甲α-乳白蛋白Elisa
越南芽孢桿 1-(4-溴苯基)辛烷ACC合成Elisa
紅緣層孔 -甲基-2-苯基烷乙酸氧化Elisa
平田頭菇10-4 2-氨基-6-羥基吡啶麥芽糖Elisa
大腸埃希 1-芐基-5-氧-3-吡咯烷羧酸甲酯糖磷酸異構Elisa
嗜酸乳桿 鹽酸氟哌噻噸果糖-1,6-二磷酸縮Elisa
高盧蜜環 5-氨基-1-(4-)-1H-吡唑-4-甲果糖-6-磷酸-1-磷酸轉移Elisa
黑根霉 L-苯甘甲酯鹽酸鹽結合態乙酸Elisa
聚生殼 2-溴-3-氟-5-吡啶β甘露聚糖Elisa
枯草芽孢桿枯草亞種 4-甲基芐磺酰β-木糖苷Elisa
沃氏富鹽 BOC-甲基-L-絲二環己基鹽查爾異構Elisa
多主葡萄殼 3-溴吡-2-羧酸甲酯亞硝酸還原Elisa
變異鏈霉 3,4-二甲基異酸苯酯辣椒斑駁病Elisa
明尼蘇達被毛孢 丁酸異戊酯脫氫奎尼酸合成Elisa
雙孢蘑菇 5-硝基-3,4-二氫萘-1(2H)-酮3-脫氧-阿伯庚酮酸糖-7-磷酸合Elisa
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。