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詳細介紹
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
商品介紹：
測定意義 纖維素酶是由微生物產生的多組分的酶系，能水解纖維素β-1,4葡萄糖苷鍵生成葡萄糖，濾紙酶是其中的一個組分，研究濾紙酶活力對纖維素酶的研究具有非常重要的意義。 測定原理 濾紙酶水解濾紙產生的還原糖能與3,5-二硝基水楊酸生成紅棕色氨基化合物，在540nm處有最大光吸收，在一定范圍內反應液顏色深淺與還原糖的量成正比，可測定計算得濾紙酶的活力。 自備實驗用品及儀器 天平、研缽、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。 |
商品屬性：
產品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產品規格 | 100管/48樣 |
產品貨號 | AS6321251 |
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照組織質量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min，調節波長到340 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
全蝎（標準品）英文名： 無磷化蛋白激MST1抗體包裝1g
全葉青蘭（標準品）英文名： Neferine多藥耐藥相關蛋白9抗體包裝250mg
拳參（標準品）英文名： 5-O-Methylvisammioside基質金屬蛋白-2抗體包裝5g
染料木苷（標準品）英文名： N－Methylcytisine基質金屬蛋白2抗體包裝1g
染料木/金雀異黃(標準品）英文名： 9-Methoxycamptothecin有絲分裂阻滯缺陷2樣蛋白1抗體包裝100g
人參（標準品）英文名： 10-Gingerol有絲分裂阻滯缺陷蛋白2抗體包裝25g
人參二(標準品)英文名： 6-gingerolβ2微球蛋白抗體包裝5g
人參莖葉（標準品）英文名： 8-Gingerol磷化神經上皮酪激/癌激10抗體包裝1g
人參蘆頭（標準品）英文名： ZingeroneE3連接MMS21蛋白抗體包裝5g
人參三(標準品)英文名： Zingerone環指蛋白60抗體包裝100g
人參皂苷CK(標準品)英文名： 6-Shogaol肌球蛋白輕鏈7抗體包裝25g
人參皂苷F1(標準品)英文名： Gypenoside XLIX心臟肌球蛋白結合蛋白抗體包裝5g
人參皂苷F2(標準品)英文名： YM201636肌球蛋白重鏈9抗體包裝1g
人參皂苷F3（標準品）英文名： Poliumoside髓系/淋巴或混合型白血病11抗體包裝25g
人參皂苷F4,人參皂苷Rg4(標準品)英文名： Hyperoside干擾誘導GTP結合蛋白MX2抗體包裝5g
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質量規格：純度99%抗副流感病IgM抗體試劑盒大黃-8-O-β-D-葡萄糖苷;Rhe
嗜寡養單胞菌Stenotrophomonas│acidaminiphila 質量規格：>95%抗副流感病IgG抗體試劑盒豆腐果苷;Helicid
芽胞桿菌Bacillus│sp. 質量規格：>98%,BR,USP可用于培養抗父體淋巴性抗體試劑盒丁東莨菪堿;Scopolamine
濾紙酶測試盒100管/48樣枯草芽胞桿 4-噠羧酸雌二受體Elisa
釀酒酵母 溴化1-基-3-甲基咪唑雌Elisa
朱紅叢赤殼 6-甲巰基雌Elisa
長雙歧桿 二十四烷雌受體Elisa
小單孢 次氮基三乙酸三鈉鹽促紅生成受體Elisa
枯草芽孢桿 4-溴-3-苯甲促甲狀腺Elisa
釀酒酵母 3--2-氟甲苯促甲狀腺釋放Elisa
孢籃狀 3-甲酰促卵泡Elisa
殼 1-芐基-3-酮鹽酸鹽促腎上腺皮質釋放Elisa
干草寒冷桿 5-溴-2-(甲巰基)-4-嘧啶甲酸促腎上腺皮質Elisa
大腸埃希氏 1-溴-4--2,5-二促腎上腺皮質釋放因子Elisa
沼澤紅假單胞 1-芐基-3-甲酸甲酯促生長釋放Elisa
納塔爾鏈霉 2-氟-6-羥基吡啶促性腺釋放Elisa
大腸埃希氏 異植物催產Elisa
四脊裸胞殼 2,4-二氟二苯甲酮催乳Elisa
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