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詳細介紹
商品介紹：
測定意義： 淀粉磷酸化酶（Starch Phosphorylase，SP）是淀粉代謝過程的可逆反應酶，既可催化淀粉的合成，也可催化淀粉的分解。 在高等植物中，淀粉磷酸化酶（合成方向）主要存在于質體中，負責延長淀粉的 α-1,4-葡萄糖鏈的非還原末端；淀粉磷酸化酶（分解方向）主要存在于細胞質基質中，催化淀粉中的α-1,4-糖苷鍵磷酸解產生葡萄糖-1-磷酸，負責葡萄糖鏈的磷酸解，是淀粉代謝過程中的關鍵酶。 在植物體中，淀粉磷酸化酶分解方向的底物無機磷濃度比合成方向的底物葡萄糖-1-磷酸濃度幾乎高了兩個數量級，一般認為淀粉磷酸化酶只催化淀粉的分解，因此，分解方向的淀粉磷酸化酶具有重要測定意義。 測定原理： 淀粉磷酸化酶催化淀粉中的α-1,4-糖苷鍵與無機磷反應產生葡萄糖-1-磷酸，葡萄糖-1-磷酸在磷酸葡萄糖變位酶的作用下產生葡萄糖-6-磷酸，并在6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化下還原NADP+產生NADPH，使340nm下吸光值增加。 需自備的儀器和用品： 紫外分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
商品屬性：
產品名稱 | |
檢測方法 | 紫外分光光度法 |
產品規格 | 50管/48樣 |
產品貨號 | AS6321214 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照組織質量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min，調節波長到340 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
白花前胡A英文名： 2-Naphthol白介1受體9抗體包裝5g
白花前胡（標準品）英文名： 1-Nitroso-2-NaphtholRasGTP激活蛋白IQGAP3抗體包裝5g
白花前胡乙（標準品）英文名： Sulfochlorophenol S sodium calcium saltIroquois同源蛋白1抗體包裝100g
白花蛇舌草（標準品）英文名： 1-Naphthol跨膜蛋白BRI抗體包裝25g
白樺脂(標準品）英文名： Guaiacol跨膜蛋白ITM2C抗體包裝10g
白樺脂（標準品）英文名： NaphtholAS白介31抗體包裝1g
白樺脂（標準品）英文名： Anthrone人血清型免疫球蛋白A抗體包裝25g
白及（標準品）英文名： Thiomichler's ketoneIrx3蛋白抗體包裝5g
白蠟樹（標準品）英文名： Ninhydrin 頂端體蛋白10抗體包裝1g
白蘞（標準品）英文名： Phenidone人分泌型免疫球蛋白A包裝250mg
白麻苷英文名： ARA-AMP;Vidarabine monophosphate胰島自身抗原1抗體包裝1g
白茅根（標準品）英文名： α-Naphthoflavone胰島基因增強結合蛋白2抗體包裝25g
白皮杉,3'-羥基白藜蘆;比杉特(標準品)英文名： Murexide白介-16抗體包裝5g
白皮杉-3'-O-葡萄糖苷英文名： Hydroxylammonium chloride離子鈣接頭蛋白抗體包裝25ml
白前（標準品）英文名： 3,3'-DimethylnaphthidineIroquois同源蛋白4抗體包裝250mg
: FERMBP3825資源名稱: 惡臭假單胞菌 質量規格：>99%,USP,Aromatase inhibitor類風濕因子試劑盒胡桃醌;
蜜蜂生球擬酵母Torulopsis│apicola 質量規格：>99%,標準品類風濕因子試劑盒灰氈毛忍冬皂苷;Macranthoid
諾氏菌屬菌種Nocardia│sp. 質量規格：>98%,AR類風濕因子試劑盒海藻糖;Trehalose
淀粉磷酸化酶（SP)測試盒50管/48樣紅色紅曲霉 N-Boc-2,5-二氫-1H-吡咯6-磷酸果糖激Elisa
葡萄座腔 烯酸乙氧基乙氧基乙酯山梨氧化Elisa
賴芽胞桿屬 N(α)-Boc-L-2,3-二蔗糖轉運體Elisa
禾赤鐮孢 2-溴蒽糖轉運蛋白Elisa
Debaryomyces prosopidis 雙(頻哪合)二單糖轉運蛋白Elisa
土曲霉 5-溴-2-噻吩羧酸馬鈴薯病YElisa
枯草芽孢桿 甘-15N馬鈴薯病AElisa
樹舌 3--4-吡啶甲馬鈴薯病SElisa
飼料類芽孢桿 維地洛馬鈴薯病MElisa
慢生根瘤 trans-4-(4-ethylcyclohexyl)benzonitrile谷氨酰Elisa
香菇 (R)-1-Boc-3-羧基吡咯烷尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化Elisa
ATCC 700324 4,4′-二叔丁基-2,2′-聯吡啶赤霉合成Elisa
澳型核果褐腐病 氘代吡啶-d5花青Elisa
截形炭團 4,4'-二甲氧基二苯甲萘乙酸Elisa
球孢白僵 β-D-別吡喃糖赤霉8Elisa
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
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