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詳細介紹
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
商品介紹：
測定意義 植酸酶（phytase）是催化植酸及其鹽類水解為肌醇與磷酸（鹽）的一類酶的總稱，屬磷酸單酯水解酶,它能將食品和飼料中植酸及其鹽轉化為可供有機體利用的有效磷，降低糞便中的磷含量，減輕對環境的污染，改善營養成分的吸收和利用，因此具有極其廣泛的研究和應用價值。 測定原理 植酸酶在一定溫度和pH值條件下，水解底物植酸鈉生成無機磷與肌醇衍生物，無機磷在酸性環境中與鉬酸銨顯色劑反應生成藍色復合物，在700nm處有特征吸收峰，根據700nm處吸光值變化可計算得植酸酶活性。 自備實驗用品及儀器 天平、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋，超聲溶解器，回旋式振蕩器。 |
商品屬性：
產品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產品規格 | 50管/24樣 |
產品貨號 | AS6321355 |
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照組織質量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min，調節波長到340 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
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巨大芽孢桿菌中心體蛋白55kDa抗體Human CORT(Corticosterone) ELISA Kit人抑制B(INH-B)免疫試劑盒
地衣芽胞桿菌富含半胱與表皮生長因子樣蛋白2抗體Human PGRN(Progranulin) ELISA Kit人抑制A(INH-A)免疫試劑盒
謝瓦曲霉骨架相關蛋白2/腫瘤和微管相關蛋白抗體Human OxHDL(Oxidized high-density lipoprotein) ELISA Kit人異質性胞核核糖核蛋白R(hnRNP R)免疫試劑盒
草假單胞菌染色質修飾蛋白4B(4C)抗體Human TUBA1B(Tubulin alpha-1B chain) ELISA Kit人異質性胞核核糖核蛋白P2(hnRNP P2)免疫試劑盒
弗氏鏈霉菌磷化受體酪激c-Abl抗體Human CORT(Corticosterone) ELISA Kit人異質性胞核核糖核蛋白M(hnRNP M)免疫試劑盒
木菇屬磷化受體酪激c-Abl抗體Human PGRN(Progranulin) ELISA Kit人異質性胞核核糖核蛋白L(HNRPL)抗體免疫試劑盒
瓜果腐霉磷化受體酪激c-Abl抗體Human CAGE1(Cancer associated gene 1 protein) ELISA Kit人異質性胞核核糖核蛋白L(hnRNP L)免疫試劑盒
釀酒酵母酪蛋白激1γ2抗體Human CFHR2(Complement factor H-related protein 2) ELISA Kit人異質性胞核核糖核蛋白K(hnRNP K)免疫試劑盒
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克羅諾桿菌屬粘附分子4抗體Human S100 Protein ELISA Kit人異質性胞核核糖核蛋白G(hnRNP G)免疫試劑盒
嗜熱側孢霉鈣調蛋白結合轉錄激活因子1抗體Human KCND3(Potassium voltage-gated channel subfamily D member 3) ELISA Kit人異質性胞核核糖核蛋白E(hnRNP E)免疫試劑盒
羅倫隱球酵母周期依賴性激5激活結合蛋白C53抗體Human PCOL-I(Procollagen I) ELISA Kit人異質性胞核核糖核蛋白D(hnRNP D)免疫試劑盒
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