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詳細介紹
商品屬性：
產品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產品規格 | 50管/48樣 |
產品貨號 | AS6321107 |
商品介紹：
測定意義： LAP是一類能水解肽鏈N-末端為亮氨酸的酶，廣泛存在于肝、腎、胰等組織中，尤其以肝臟中含量最為豐富。各類肝病患者因肝細胞損傷，血清LAP的活性均有不同程度的升高，因此，血清LAP活性的檢測能從不同側面反映各種肝病的發生和發展。 測定原理： LAP分解L-亮氨酰對硝基苯胺生成對硝基苯胺，后者在405nm有最大吸收峰，通過測定吸光值升高速率來計算LAP活性。 自備用品： 可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照組織質量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min，調節波長到340 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
脲(標準品)英文名： Tiotropium bromide hydrate 6號染色體開放閱讀框222抗體包裝1g
脲雜質2（標準品）英文名： Amiodarone HCl熱休克蛋白58抗體包裝1g
脲雜質Ⅰ/4-[2-(3-乙基-4-基-2-氧...英文名： Amiodarone HCl色C P450 17A1抗體包裝100g
齊特（標準品）英文名： Amotriptan malate膜蛋白CLDND1抗體包裝25g
齊特雜質Ⅰ/1-（3-氮雜雙環[3.3.0]辛基）...英文名： Vidarabine/Ara-A二氫嘧啶相關蛋白1抗體包裝5g
(標準品)英文名： Vidarabine/Ara-A霉單克抗體包裝100ml
（標準品）英文名： Ampicillin TrihydrateCD98重鏈抗原抗體包裝25ml
庚炔諾（標準品）英文名： Ampicillin Trihydrate鈣蛋白抑制蛋白抗體包裝500ml
枸櫞鉍（標準品）英文名： Atipamezole HClcGMP依賴性蛋白激1抗體包裝1g
枸櫞己定（標準品）英文名： Atipamezole HCl胞漿鈣獨立磷脂A2抗體包裝100g
枸櫞莫沙比(標準品)英文名： Azatadine Maleate1號染色體開放閱讀框98抗體包裝500g
枸櫞噴妥維林（標準品）英文名： Bambuterol HClCOX4NB蛋白抗體包裝1g
枸櫞E－異構體英文名： Bambuterol HCl腫瘤/抗原77抗體包裝5g
枸櫞鋅（標準品）英文名： Benserazide HClCD81抗體包裝1g
枸櫞奧芬那君;枸芬那君(標準品)英文名： Canagliflozin輔Q10B抗體包裝100g
蠕形青霉Penicillium│vermiculatum 質量規格：HPLC>98%,標準品鋅指蛋白644試劑盒維生B2;Vitamin B2
芽孢桿菌Bacillus│sp. 質量規格：>98%,富馬鹽,BR鋅α2糖蛋白試劑盒維生E;Vitamin E
#白色短桿菌Curtobacterium│albidum (Komagata and Iizuka) Yamada and Komagata 質量規格：≥98%，標準品心型脂肪結合蛋白試劑盒維生C;Vitamin C
亮氨酸氨基肽酶（LAP）測試盒50管/48樣普通變形桿 3-基苯酸頻哪酯盤狀結構域受體家族成員1Elisa
橙鱗傘2 正戊基三苯基溴化磷血管內皮生長因子受體1Elisa
北里胞 5-溴-3--2-甲酸甲酯血管內皮生長因子受體4Elisa
羊無漿體（青海海宴株） (三苯基亞正膦基)乙視黃Elisa
鮑姆針層孔 (S)-(-)-2-羧基環丁鱗狀癌相關抗原2Elisa
枯草芽孢桿 2--6-甲酸神經營養受體P75Elisa
鼠李糖乳桿 3-溴苯基硫脲低氧誘導因子1Elisa
棘孢曲霉 4,6-二-5-氟嘧啶精漿彈性硬蛋白Elisa
釀酒酵母 1-芐基-2-羧酸精漿彈性硬蛋白Elisa
類阿達青霉 4-異硫酸苯酯糖類抗原15-3Elisa
帶小棒鏈霉 2-(3,4-二芐基)苯并咪唑半乳糖苷Elisa
都柏林克羅諾桿都柏林亞種 2,3-二溴-1,4-二半胱氨酰白三烯Elisa
球孢白僵 3-溴-5-氟苯乙DDX4Elisa
Sphingomonas abaci 1-萘乙酸乙酯基膜聚糖；內腔蛋白Elisa
大腸埃希 3-羥基己酸甲酯前腎Elisa
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