LB冷凍緩沖液公司正在銷售的產(chǎn)品：兔半乳凝集素1(GAL1)試劑盒Anti-CCR2 Antibody絲/蘇蛋白磷酸酶3B抗體
兔降鈣素原(PCT)試劑盒 Anti-CCR10 Antibody蛋白香葉烯基轉(zhuǎn)移酶1α抗體
兔拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子(AATF)試劑盒Anti-CCR2 Antibody泛素連接酶抗體
兔泛素分解酶(DUB)試劑盒 Anti-CCR1 AntibodyPGBD3蛋白

產(chǎn)品分類：培養(yǎng)基

儲存條件  4℃,6個(gè)月

用途  保存細(xì)菌的培養(yǎng)基

注意事項(xiàng)  無菌溶液。主要由LB培養(yǎng)基、硫酸銨、甘油等組成,經(jīng)過濾除菌處理。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！

 

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

組織金屬蛋白抑制因子2(TIMP2)TIMP2 ELISA Kit磷化Bax抗體包裝250mg

組織金屬蛋白抑制因子1(TIMP1)TIMP1 ELISA Kit磷化癌抗雌激耐藥蛋白1抗體包裝25ml

組織蛋白Z(CTSZ)CTSZ ELISA Kit磷化癌抗雌激耐藥蛋白1抗體包裝5ml

組織蛋白S(CTSS)CTSS ELISA Kit磷化癌抗雌激耐藥蛋白1抗體包裝1g

組織蛋白L(CTSL)CTSL ELISA Kit磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體包裝5g

組織蛋白K(CTSK)CTSK ELISA Kit肌動(dòng)蛋白樣蛋白6A抗體包裝100g

組織蛋白G(CTSG)CTSG ELISA Kit磷化紅陰離子交換蛋白1抗體包裝25g

組織蛋白D(CTSD)CTSD ELISA Kit磷化紅陰離子交換蛋白1抗體包裝5g

組織蛋白A(CTSA)CTSA ELISA Kit障礙自整合蛋白BAF抗體包裝200mg

組蛋白脫乙酰基4(HDAC4)HDAC4 ELISA Kit磷化轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體包裝1g

組蛋白脫乙酰基2(HDAC2)HDAC2 ELISA Kit磷化轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體包裝1g

組蛋白脫乙酰基1(HDAC1)HDAC1 ELISA Kit磷化B-Raf抗體包裝250mg

組蛋白H4(H4)H4 ELISA Kit磷化B-Raf抗體包裝1g

組蛋白H3(H3)H3 ELISA Kit磷化B-Raf抗體包裝5g

組蛋白H2B(H2B)H2B ELISA Kit磷化B-Raf抗體包裝1g

二磷腺苷核糖基化因子6相互作用蛋白抗體干擾α14(IFNα14)MK 2206 dihydrochloride 是一種口服有效的 Akt 變構(gòu)抑制劑，抑制 Akt1/Akt2/Akt3 的 IC50 分別為 5 nM/12
LB冷凍緩沖液factor VIII/FITC  熒光標(biāo)記第八因子相關(guān)抗原IgG腺-5′-三二鈉鹽，三水 98%

factor X III /FITC  熒光標(biāo)記ⅩⅢIgG三脫氧腺鈉鹽 98%

FADD/FITC  熒光標(biāo)記Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白IgG三脫氧腺鈉鹽溶液 dATP,0 mM 溶液, pH 7.0

FADD/FITC  熒光標(biāo)記Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白IgG胞-5'-三二鈉鹽(CTP)  95%

Phospho-FADD (Ser191) Mouse Specific /FITC  熒光標(biāo)記兔抗小鼠化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白IgG腺-3'，5'-環(huán) 99%

Phospho-FGF Receptor 1 (Tyr766) /FITC  熒光標(biāo)記化性成纖維生長因子受體1IgG三脫氧胞鈉鹽 98%

P-FADD/FITC  熒光標(biāo)記化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白IgG三脫氧鳥鈉鹽 98%

FAF1/FITC  熒光標(biāo)記Fas相關(guān)1因子IgG2'-脫氧胸-5'-三三鈉,二水 96%