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詳細介紹
商品屬性：
產品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產品規格 | 50管/24樣 |
產品貨號 | AS6321115 |
商品介紹：
測定意義 半胱氨酰亞砜裂解酶（CSL）廣泛存在于百合科蔥屬(如大蒜和洋蔥)，十字花科蕓薹屬 (如卷心菜，菜花，西蘭花)，以及豆科中的合金歡屬中，并通常被稱為蒜氨酸酶(Alliinase)。香菇酸在γ-谷氨酰轉肽酶和半胱氨酸亞砜裂解酶的作用下轉化成香菇精，以及產生丙酮酸、乙醛、甲醛和NH3。CSL是內源性甲醛生成的關鍵酶之一，測定CSL活性對于研究食品安全具有重要意義。 測定原理 CSL催化S-甲基-L-半胱氨酸亞砜反應產生丙酮酸，與2,4-二硝ji苯肼反應，在堿性條件下顯棕紅色，在510nm下有特征吸收峰。 自備實驗用品及儀器 天平、研缽、離心機、分光光度計、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋、蒸餾水。 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照組織質量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min，調節波長到340 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
化琥珀酰(標準品)英文名： Amidopyrine/aminopyrine1號染色體開放閱讀框229抗體包裝1g
化（標準品）英文名： Angiotensin II殺菌肽/天蠶抗菌肽抗體包裝25g
（標準品）英文名： Vitamin D3Cullin 4a蛋白抗體包裝5g
化乙酰(標準品)英文名： Pazopanib HCl角蛋白3抗體包裝250mg
解磷定（標準品）英文名： Tiotropium bromide anhydrous 5號染色體開放閱讀框52抗體包裝10mg
雷他定(標準品)英文名： Formoterol fumarate 卷曲螺旋結構域蛋白85B抗體包裝50mg
霉(標準品)英文名： Formoterol fumarate 緊密連接蛋白14抗體包裝1g
霉二物（標準品）英文名： Faropenem sodium人巨病單克抗體包裝100g
扎（標準品）英文名： Faropenem sodium癌胚抗原抗體包裝25g
諾昔康(標準品)英文名： Orlistat(synthesis)表面趨化因子受體3抗體包裝500g
普噻噸（標準品）英文名： Rifamycin sodium salt1號染色體開放閱讀框33抗體包裝1g
羥吡啶;吡多(標準品)英文名： Octreotide acetate磷化轉錄調節因子CEBP α 抗體包裝5g
屈膦二鈉(標準品)英文名： (S)-(+)-2-Amino-1-butanol 磷化轉錄調節因子CEBP β抗體包裝100ml
噻（標準品）英文名： trans-D-erythro-sphingosine磷化轉錄調節因子CEBP β抗體包裝25ml
噻（標準品）英文名： ribophytosphingosine hydrochloride磷化整合β2/Integrin β2抗體包裝1g
40595=ATCC15722,CBS785.72,IMRU3751,ISP5595,JCM3045,JCM4805,RIA1445資源名稱: 橄欖色菌核鏈霉菌 質量規格：>98,BR外基質磷糖蛋白試劑盒褪黑;Melatonine
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規格：>98%,BR色P450c21B/21-羥化試劑盒通關藤苷H;Tenacissoside
AS2.1182資源名稱: 克魯斯假絲酵母 質量規格：HPLC>98%,標準品色P450c21A/21-羥化試劑盒脫內酯琥珀半酯;Dehydro
半胱氨酰亞砜裂解酶（CSL)測試盒50管/24樣綠色木霉 苯硫基乙酸胃癌抗原MG7Elisa
擴展青霉 3-(2-吡啶基氨基)酸乙酯IElisa
姬菇 1-苯基氨基脲IIIElisa
2--3-氟IVElisa
衛矛 3-(4-溴苯基)-9-苯基-9H-咔唑VElisa
枯草芽孢桿 2-甲氧基-3-溴-5-吡啶ⅦElisa
黃海鞘氨盒 氧化異佛爾酮ⅧElisa
香菇 3-甲基-2-苯基吡啶ⅨElisa
伯頓絲孢畢赤酵母 L-3-環基ⅪElisa
巴斯德畢赤酵母 3--5-甲氧基苯XIIElisa
費氏中華根瘤 3-溴芐ⅡElisa
澳型核果褐腐病 Fmoc-L-苯甘2,3-雙加氧1Elisa
鞘氨單胞 N,N'-二芐基-1,3-二鈣結合蛋白B1Elisa
銀杏盤多毛孢 2,3-二磷脂A2Elisa
pESC-Ura 4'-甲氧基-2-苯基苯乙酮elabelaElisa
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