詳細介紹
商品屬性:
產品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產品規格 | 100管/96樣 |
產品貨號 | AS6321257 |
商品介紹:
測定意義 半纖維素是植物細胞壁中與纖維素緊密結合的多糖混合物,是構成細胞初生壁的主要成分,廣泛存在于植物中,是一種新型可利用能源。 測定原理 半纖維素經酸處理后轉化成還原糖,與DNS生成紅棕色物質,在540nm有特征吸收峰,吸光值大反映了半纖維素含量。 需自備的儀器和用品、 天平、40目篩,恒溫水浴鍋、烘箱、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照組織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照組織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
鐵筷子(標準品)英文名: Crocin II雷帕霉靶蛋白抗體包裝5g
鐵皮石斛(標準品)英文名: Tenuifolin粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗體包裝100mg
鐵掃帚(標準品)英文名: Agrimol B粘蛋白4抗體包裝500mg
鐵莧菜(標準品)英文名: Sanguinarinev-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗體包裝1g
葶藶子(播娘蒿)(標準品)英文名: Vanillic acid基質金屬蛋白-10抗體包裝250mg
葶藶子(獨行菜)(標準品)英文名: Vanillic acid突變型P53抗體包裝5g
通關藤(標準品)英文名: Typhaneoside蜜蜂微孢子蟲蛋白抗體包裝1g
通關藤苷G(標準品)英文名: Diosmetin-7-O-β-D-glucopyranoside基質金屬蛋白-24抗體包裝250mg
通關藤苷H(標準品)英文名: Sclareol巨噬甘露糖受體抗體包裝25g
通關藤苷I(標準品)英文名: Berberine胃粘液抗體包裝5g
麝香(標準品)英文名: Neobavaisoflavone基質金屬蛋白20抗體包裝1g
頭花蓼(標準品)英文名: Neohesperidin尿調節蛋白抗體包裝100g
透骨香(標準品)英文名: Neoandrographolide肌增強因子2抗體包裝25g
土貝母苷英文名: Neomangiferin肌原調節蛋白抗體包裝1g
土貝母苷(標準品)英文名: Arbutin神經母特異性轉移因子抗體包裝5g
亮白曲霉Aspergillus│candidus 質量規格:>95%,BR軍團菌抗體IgM試劑盒橙花;Nerol
平菇Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm. 質量規格:HPLC≥98.0%,標準品軍團菌抗體IgG試劑盒長梗秦艽;Waltonitone
匍枝根霉(黑根霉)Rhizopus│stolonifer 質量規格:HPLC>97%軍團菌抗體IgA試劑盒長春瑞濱;Vinorelbine
半纖維素含量測試盒100管/96樣腸炎沙門氏 3-(N-甲酰氨)苯基酸磷酸化酪羥化Elisa
大腸桿 5-(1-羧乙基)-2-(苯硫基)磷酸化外信號調節激Elisa
弗氏志賀氏 氟尼酸磷酸化腺苷酸活化蛋白激Elisa
地衣芽胞桿 5-氟-2-三氟甲基芐磷酸化腺苷酸活化蛋白激Elisa
產色鏈霉 3-氟-5-甲氧基苯磷酸化血管內皮生長因子受體2Elisa
黃曲霉 5-磺基水楊酸鈉磷酸肌酸激Elisa
蠟狀芽孢桿 2-氨基-6-甲酸磷酸烯式酮酸羧激Elisa
尖孢鐮刀 醋酸奧曲肽磷脂肌3激Elisa
假單胞屬 苯基二酸二乙酯磷脂轉移蛋白Elisa
異常威克漢姆酵母 苯茚二酮硫酸肝糖蛋白2Elisa
馬勃 4-(4-吡啶基)硫氧還蛋白還原Elisa
伊氏副球 4-乙基吡唑硫氧化還原蛋白Elisa
洋蔥伯克霍爾德氏 2--3-氟-5-溴吡啶卵清蛋白特異性IgE抗體Elisa
金針菇(毛柄、冬菇) 氟鉻酸吡啶酯卵清蛋白特異性IgG抗體Elisa
大腸埃希氏(大腸桿) 環十二酮卵清蛋白特異性IgG1抗體Elisa