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詳細介紹
商品介紹：
測定意義： Hephaestin (HP)作為銅藍蛋白的同系物,是近年來發現的鐵轉運蛋白亞鐵氧化酶，HP屬亞鐵氧化酶家族成員,具有亞鐵氧化酶的活性,參與體內鐵代謝。HP的表達可受鐵、銅及鋅等金屬離子的調節。HP催化Fe2+氧化生成Fe3+，在介導鐵的跨膜轉運中有重要作用。 測定原理： HP催化Fe2+氧化為Fe3+，Fe2+和ferrozine反應顯色，在560 nm下有特征吸光值。通過測定Fe2+的減少速率可測得亞鐵氧化酶的活性。 自備用品： 酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
商品屬性：
產品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產品規格 | 100管/96樣 |
產品貨號 | AS6321365 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照組織質量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min，調節波長到340 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
球孢白僵菌克侖特羅/抗體Human α1-AT(Alpha 1-Antitrypsin) ELISA Kit人角蛋白18-M30(CK 18-M30)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌斯氏亞種6號染色體開放閱讀框151抗體Human α2-AP(α2-Antiplasmin) ELISA Kit人角蛋白18(CK-18)免疫試劑盒
秦氏蜜環菌15號染色體開放閱讀框52抗體Human αHSP(Alpha-Hemoglobin Stabilizing Protein) ELISA Kit人間粘附分子3(ICAM-3/CD50)免疫試劑盒
嗜鹽擬諾氏菌2號染色體開放閱讀框89抗體Human β-actin(Beta actin) ELISA Kit人間粘附分子2(ICAM-2/CD102)免疫試劑盒
瘦弱鹽扁平菌BCL10結合蛋白和激活核轉錄因子抗體Human ACP(Acid phosphatase) ELISA Kit人間粘附分子1(ICAM-1/CD54)免疫試劑盒
相思根瘤菌凋亡加強結構域蛋白15抗體Human MBP(myelin basic protein) ELISA Kit人性T淋巴相關抗原4(CTLA-4/CD152)免疫試劑盒
澳型核果褐腐病菌慢性淋巴白血病缺失基因6蛋白抗體Human SOCS4(Suppressor Of Cytokine Signaling 4) ELISA Kit人相關蛋白A(CagA)抗體(IgG)免疫試劑盒
米曲霉13號染色體開放閱讀框38抗體Human AA(Arachidonic Acid) ELISA Kit人相關蛋白A(CagA)免疫試劑盒
白僵菌14號染色體開放閱讀框140抗體Human VASPIN(Visceral Adipose Specific Serine Protease Inhibitor) ELISA Kit人凋亡相關斑點樣蛋白(PYCARD)免疫試劑盒
溶壁（lywallzyme）陽離子轉運調節樣蛋白2抗體Human VEGF165(Vascular Endothelial Growth Factor165) ELISA Kit人硒結合蛋白1(SELENBP1)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌15號染色體開放閱讀框62抗體Human VEGF-B(Vascular Endothelial Cell Growth Factor B) ELISA Kit人硒蛋白P(SEPP1)免疫試劑盒
澳型核果褐腐病菌15號染色體開放閱讀框41抗體Human VIL1(Villin 1) ELISA Kit人戊型肝炎病抗體(IgM)免疫試劑盒
大腸埃希菌環核苷陽離子通道蛋白α2抗體Human VEGF-D(Vascular Endothelial Growth Factor D) ELISA Kit人戊型肝炎病抗體(IgG)免疫試劑盒
宋氏志賀氏菌鈣連蛋白抗體Human τPK1(Tau-Protein Kinase) ELISA Kit人戊糖(Pentosidine)免疫試劑盒
恥垢分枝桿菌二氫嘧啶相關蛋白2抗體Human TPA(Tissue Polypeptide Antigen) ELISA Kit人舞蹈病蛋白相互作用蛋白1(HIP1)免疫試劑盒
深綠木霉色P450ⅡE1抗體Human TPS(Tryptase) ELISA Kit人五聚3(PTX3)免疫試劑盒
綠色木霉Trichoderma│viride 質量規格：>98%，BRDickkopf 3試劑盒喹
多粘類芽胞桿菌Paenibacillus│polymyxa 質量規格：BRDickkopf 1試劑盒齊特
頂孢霉屬Acremonium│sp. 質量規格：>99%,BCDicer-1 枸橘苷
亞鐵氧化酶（HP）測試盒100管/96樣葡萄座腔 3-溴-2-基吡啶整合αVβ3Elisa
厚白盤革 6-馬來酰亞丁酸整合連接激Elisa
黑腐皮殼 2-溴-3--5-酸正常T表達和分泌因子Elisa
球孢白僵 仲丁基酸脂蛋白aElisa
皺褶青霉 6-溴吡啶-2-酸頻哪酯脂蛋白磷脂A2Elisa
枯草芽孢桿 1,3-苯二酸脂蛋白脂Elisa
麥芽糖假絲酵母 4-正丁基苯酸脂多糖Elisa
大耳霉 4-正丁氧基苯酸脂多糖結合蛋白Elisa
弗雷德里克斯堡假單胞 4-頻哪酯脂多糖抗體Elisa
黑曲霉 4-(溴甲基)苯酸脂肪甘油三酯脂Elisa
巨型艾耳球蟲 4-(芐氧基羰基)苯酸脂肪Elisa
堆形艾耳球蟲 3-丁氧基苯酸脂肪酸合成Elisa
芽孢桿屬 3-丁氧基苯酸脂肪酸脫氫Elisa
樟疫霉 3-(溴甲基)苯酸脂褐質Elisa
蘇云金芽孢桿日本亞種 聯酸新戊二酯脂聯Elisa
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
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