詳細(xì)介紹
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
可見分光光度法 | 50管/48樣 | AS6321200 |
商品介紹:
商品介紹 測定意義 低密度脂蛋白為血清蛋白之一,主要由肝臟合成,與冠心病的發(fā)生和動脈粥樣硬化損傷呈正相關(guān),是脂類疾病分類和風(fēng)險預(yù)測的一個重要指標(biāo)。 測定原理 用沉淀劑分離血清中的低密度脂蛋白膽固醇,利用酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇和游離脂肪酸,從而把膽固醇酯轉(zhuǎn)化為FC;進(jìn)一步利用膽固醇氧化酶催化FC氧化,生成△4-膽甾烯酮和H2O2;再利用過氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替bi林和酚,生成紅色醌類化合物;在500nm有特征吸收峰。 需自備的儀器和用品 離心機(jī),恒溫水浴鍋、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、蒸餾水。 |
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
產(chǎn)品優(yōu)點如下:
1、快速簡便:雙試劑,直接操作,快速、簡便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗: X =102.3%。7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當(dāng)時,即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
洋川芎內(nèi)酯I(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: L-Alanamine Hydrochloride絲/蘇蛋白激蛋白抗體包裝25g
洋薊;1,5-二咖啡酰奎寧(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: L-Histidine monohydrate monohydrochlorideHAUS5蛋白抗體包裝1ml
氧代川南亭堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: L-Homoarginine Hydrochloride 組織H4受體抗體包裝1ml
氧化白藜蘆(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: TPCKmRNA cap基轉(zhuǎn)移抗體包裝1ml
氧化白藜蘆-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名: TPCK5’-三磷聚核苷抗體包裝1g
氧化白藜蘆-3'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名: Ala-Gln 組三聚體核苷結(jié)合蛋白1抗體包裝25g
氧化槐定堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: H-Arg-OMe·2HCl狀腺促進(jìn)激alpha鏈包裝5g
氧化槐果堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: D-Alaninamide hydrochlorideA型流感病H7N9凝集抗體包裝1g
氧化苦參堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Fenticonazole Nitrate組蛋白去乙酰化3抗體包裝250mg
氧化前胡(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 1-Benzyl D-Glutamate人乙肝表面抗原抗體(包被)包裝5g
氧化芍藥苷,羥基芍藥苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: D-Phenylalanine 腎損傷分子1抗體(型肝炎病受體1)包裝1ml
藥根堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: D-Alanine組富含脯糖蛋白抗體包裝1ml
野百合堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: β-AlanineHER3受體抗體包裝100g
野黃芩苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: β-Alanine磷化HER3受體抗體包裝25g
野黃芩(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: D-Tryptophan磷化HER3受體抗體包裝100g
強(qiáng)酒海桿菌Marinobacter│vinifirmus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98.0% ,標(biāo)準(zhǔn)品卵巢癌抗原X1試劑盒;Caffeine
陰溝腸桿菌Enterobacter│cloacae 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR離子胞內(nèi)通道蛋白4試劑盒比多巴;S-(-)-Carbidopa
: AS4.867資源名稱: 天藍(lán)色鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR綠膿桿菌外A試劑盒基異茜草;Rubiadin、 1,3
血清低密度脂蛋白(LDLC)測試盒50管/48樣枯草芽孢桿 N-Boc-DL--2-甲酸可溶性淀粉Elisa
植物乳桿植物亞種 (R)-(+)-啉-2-羧酸可溶性糖Elisa
大腸埃希 5-硝基酪脫羧Elisa
假單胞 1,1'-雙(二異基膦)二茂鐵磷酸果糖激Elisa
松樹噬幾丁質(zhì) 二(五甲基環(huán)戊二烯基)合釕(III)聚合物磷酸果糖激1Elisa
糞腸球 乙酸甲酯磷酸烯式酮酸羧化Elisa
球孢白僵 [1,1'-雙(二-苯基膦基)二茂鐵]化鈀(II),二復(fù)合物(1:1)磷酸烯式酮酸羧激Elisa
炭黑曲霉 4-氨基-2-嘧啶-5-甲磷脂酸Elisa
梭 2-溴-5-氟苯甲綠色熒光蛋白Elisa
釀酒酵母 甲酯酸Elisa
蕁麻青霉 4,5-二-3-羥基噠酸甲酯Elisa
豬鏈球 喹哪啶酸木質(zhì)Elisa
蘇云金芽胞桿 N-甲氧基-N-(基硅烷甲基)芐尿苷二磷酸Elisa
葡萄座腔 2-(溴甲基)苯酸脲Elisa
無藥品 耐膽鹽革蘭陰性(陰性) 4-(2-萘基)苯酸檸檬酸合Elisa
實驗方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。