詳細介紹
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
商品介紹:
測定意義 低密度脂蛋白為血清蛋白之一,主要由肝臟合成,與冠心病的發生和動脈粥樣硬化損傷呈正相關,是脂類疾病分類和風險預測的一個重要指標。 測定原理 用沉淀劑分離血清中的低密度脂蛋白膽固醇,利用酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇和游離脂肪酸,從而把膽固醇酯轉化為FC;進一步利用膽固醇氧化酶催化FC氧化,生成△4-膽甾烯酮和H2O2;再利用過氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替bi林和酚,生成紅色醌類化合物;在500nm有特征吸收峰。 需自備的儀器和用品 離心機,恒溫水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。 |
商品屬性:
產品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產品規格 | 100管/96樣 |
產品貨號 | AS6321200 |
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照組織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照組織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
鹽藥根堿(標準品)英文名: L-Lysine methyl ester dihydrochloride同源盒蛋白C6抗體包裝10g
鹽伊立替康(標準品)英文名: L-Methionine Methyl Ester Hydrochloride同源盒蛋白C4抗體包裝10mg
鹽益母草堿(標準品)英文名: Sodium cholesteryl sulfate同源盒蛋白D13抗體包裝50mg
鹽育亨賓(標準品)英文名: O-tert-Butyl-L-serine methyl ester hydrochloride組蛋白H1.4樣蛋白抗體包裝5g
羊膽粉(標準品)英文名: L-Valine methyl ester hydrochloride 組蛋白H1FOO抗體包裝1g
羊耳菊(標準品)英文名: L-Valinamide hydrochloride 同源盒蛋白B6抗體包裝1g
羊開口(標準品)英文名: Cysteamine Hydrochloride錯構蛋白抗體包裝25g
羊奶奶葉(標準品)英文名: Glycinamide hydrochloride磷化組蛋白H1FOO抗體包裝5g
楊梅苷(標準品)英文名: L-4-Hydroxyproline methyl ester hydrochloride單純皰疹病1型轉錄調節因子ICP22抗體包裝100g
楊梅-3-O-半乳糖苷英文名: D-Leucine methyl ester hydrochlorideH2A組蛋白家族E蛋白抗體包裝25g
楊梅/楊梅(標準品)英文名: (s)-2-phenylglycine methyl ester hydrochlorideH2B組蛋白家族M蛋白抗體包裝500g
楊芽黃(標準品)英文名: H-D-Ala-OEt·HClH2B組蛋白家族成員W蛋白抗體(特異性)包裝1g
洋艾(標準品)英文名: LinagliptinPWWP域包含蛋白1抗體包裝5g
洋川芎內酯A(標準品)英文名: L-Glutamic Acid 1-Benzyl Ester高密度脂蛋白抗體包裝5g
洋川芎內酯H(標準品)英文名: H-Leu-OEt·HClHEAT重復內含蛋白1蛋白抗體包裝100g
熱帶假絲酵母Candida│tropicalis 質量規格:>98.5%,BR,可用于培養卵泡抑試劑盒苦丁冬青甙H;3-O-alpha-L-A
產黃青霉Penicillium│chrysogenum 質量規格:HPLC>99%,標準品開環異落葉松樹脂;Secoisolar
CAAS251=CCTCCAB207010=JCM14814資源名稱: 黃色涅斯特連科氏菌 質量規格:≥98.0% 相關物質及對應異構體均小于1%膽固酰基轉移試劑盒D-(-)-奎寧;Quinic aci
血清低密度脂蛋白(LDLC)測試盒100管/96樣大腸埃希氏 Z-谷安酸叔丁基酯過氧化物Elisa
釀酒酵母 對氟乙酯還原型Elisa
霍氏瓶霉 DL-10-樟腦磺酸海藻糖Elisa
釀酒酵母 3-甲基戊酸乙酯紅色葉綠降解產物還原Elisa
漢遜德巴酵母 2-溴對苯二酸胡蘿卜Elisa
疣孢青霉 5-溴-2-糠酸環磷酸腺苷Elisa
無花果擬盤多毛孢 2,6-二叔丁基吡啶活性氧Elisa
竹瘤座 2-甲基煙酰肌酸激Elisa
食用香料 折光指數、相對密度 3-溴-2-氟苯脫落酸Elisa
鹽敏芽孢桿 DL-谷氨酰幾丁質Elisa
多帶革孔 酸性棕14己糖激Elisa
少根根霉 N,1-二-Fmoc-L-組交替氧化Elisa
多主葡萄殼 3-硝基三氟甲苯精Elisa
長雙歧桿長亞種 苯并噻吩-2-酸抗壞血酸過氧化物Elisa
滑菇 N-Boc-DL--2-甲酸可溶性蛋白質Elisa