詳細介紹
公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
堿性磷酸酶封閉液 | 100ml | FS-R7211 |
產品分類:免疫組化
儲存條件:室溫,12個月
用途:免疫組織化學染色中內源性堿性磷酸酶封閉液,也稱滅活液。
注意事項:主要由左旋咪唑/鹽酸噻咪唑組成。可以與顯影液混合使用。
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。
球孢白僵菌成纖維生長因子受體1原癌基因伴侶蛋白抗體Human ZKSCAN1 ELISA Kit雞抗凝血Ⅲ(AT-Ⅲ)抗體免疫試劑盒
QT6 鈣粘蛋白家族成員7抗體Human ZC3HC1 ELISA Kit雞抗鏈球菌溶血O(ASO)抗體(IgM)免疫試劑盒
香菇Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白2/5抗體Human ZCCHC11 ELISA Kit雞抗鏈球菌溶血O(ASO)抗體(IgG)免疫試劑盒
磚紅鐮刀菌細絲蛋白A抗體Human ZFP36L2 ELISA Kit雞抗肌內膜抗體IgA(EMA IgA)免疫試劑盒
馬賽菌磷化細絲蛋白A抗體Human ZFP64 ELISA Kit雞巨噬替代激活相關化學因子1(AmAC-1)免疫試劑盒
科羅多擬無枝菌磷化細絲蛋白A抗體Human ZNF703 ELISA Kit雞窖蛋白Caveolin-1(CAV1)免疫試劑盒
粟酒裂殖酵母DNA損傷修復基因XRCC9抗體Human MCPIP(Monocyte Chemoattractant Protein-induced Protein 1) ELISA Kit雞降鈣(CT)免疫試劑盒
長根小德蘑鱗柄變種磷化細絲蛋白A抗體Human ZNF711 ELISA Kit雞堿性成纖維生長因子(bFGF)免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌磷化磷神經膜抗體Human ZNF597 ELISA Kit雞甲狀腺(T4)免疫試劑盒
釀酒酵母磷化堿性成纖維生長因子受體1抗體Human ZNF71 ELISA Kit雞甲狀旁腺激(PTH)免疫試劑盒
德爾布有孢酵母磷化磷神經膜抗體Human ZNF486 ELISA Kit雞低密度脂蛋白(VLDL)免疫試劑盒
釀酒酵母叉頭蛋白N1抗體Human ZNF600 ELISA Kit雞激敏感性脂肪(HSL)免疫試劑盒
腐殖質鏈霉菌磷化DNA損傷修復基因XRCC9抗體Human ZNF488 ELISA Kit雞基質金屬蛋白2(MMP-2)免疫試劑盒
絲衣霉菌Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白1抗體Human ZNF496 ELISA Kit雞基質金屬蛋白1(MMP-1)免疫試劑盒
澳型核果褐腐病菌Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白8抗體Human ZFP36L1 ELISA Kit雞肌紅蛋白(MYO/MB)免疫試劑盒
阿克蘇海洋桿菌Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白3B抗體Human TMPRSS4(Transmembrane protease serine 4) ELISA Kit雞肌動蛋白,質1(ACTB)免疫試劑盒
馬腺疫鏈球菌獸疫亞種Streptococcus│equi subsp.zooepidemicus 質量規格:1000µg/mL,基體:10%HCl11-羥基柳杉
黃綠蜜環菌Armillaria│mellea 質量規格:1000μg/ml,基體:0.1mol/LNaOH3β-乙酰氧基-7,25-甘遂二烯-24
: CMCC44102資源名稱: 大腸埃希氏菌(大腸桿菌) 質量規格:1000μg/ml林澤蘭內酯C
堿性磷酸酶封閉液(EGFR)ELISA Kit 大鼠表皮生長因子受體規格: 48T
(IL-2sR)ELISA Kit 大鼠白介su2可溶性受體規格: 48T
(Ntn1)ELISA Kit 大鼠軸突生長誘向因子1規格: 48T
(LDH)ELISA Kit 大鼠乳suan脫氫mei規格: 48T
(MAG Ab)ELISA Kit 大鼠抗髓鞘相關糖蛋白規格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現,至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。
5) 之后更換正常培養基培養即可。