核酸雜交漂洗液公司正在銷售的產(chǎn)品：Anti-ROBO1 Antibody小鼠β干擾素
Anti-RPA2 Antibody大鼠膽囊收縮素/腸促胰酶肽
Anti-RORC Antibody人抗神經(jīng)節(jié)苷脂抗體
Anti-RPA3 Antibody小鼠肌鈣蛋白Ⅰ
Anti-RPA32 Antibody大鼠腦腸肽
Anti-RPAP2 Antibody人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體
Anti-RPA4 Antib

產(chǎn)品分類：核酸雜交

儲存條件：室溫,6個(gè)月

用途：核酸雜交后漂洗溶液

注意事項(xiàng)：主要由SSC、曲拉通-100、滅菌水等組成,離子強(qiáng)度較低。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

糖化酵母巨噬炎癥蛋白2（ GRＯβ）抗體Human NCOR1(Nuclear receptor corepressor 1) ELISA Kit可溶性O(shè)X40L(sOX40L)

側(cè)耳金屬硫蛋白抗體Human FUT6(Alpha-(1,3)-fucosyltransferase) ELISA Kit可溶性E選擇(sE-selectin)

綠色木霉磷化微管相關(guān)蛋白2抗體Human HNRNPK(Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K) ELISA Kit可溶性Endoglin(sENG/sCD105)

芽孢桿菌屬內(nèi)皮MMRN1蛋白抗體Human DEFB1(Beta-defensin 1) ELISA Kit可溶性CD86(B7-2/sCD86)

硬毛栓孔菌磷化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體Human CCBL1(Kynurenine–oxoglutaRate transaminase 1) ELISA Kit可溶性CD44變體9(sCD44-v9)

拜氏色鹽桿菌磷化肝生長因子受體(原癌基因)抗體Human AVP(Vasopressin-neurophysin 2-copeptin) ELISA Kit可溶性CD40配體(sCD40L)

多根硬皮馬勃磷化肝生長因子受體(原癌基因)抗體Human DEFB4A(Beta-defensin 4A) ELISA Kit可溶性CD38(sCD38)

釀酒酵母磷化髓樣白血病-1抗體Human IRS2(Insulin receptor substRate 2) ELISA Kit可溶性CD30配體(sCD30L)

平菇磷化雙微體2癌基因抗體Human SLC8A1(Sodium/calcium exchanger 1) ELISA Kit可溶性CD28(sCD28)

芽枝狀枝孢磷化肌增強(qiáng)因子2抗體Human ESRRG(Estrogen-related receptor gamma) ELISA Kit可溶性CD276分子(sCD276/sB7-H3)

小馬勃磷化肌增強(qiáng)因子2抗體Human SLC11A2(Natural resistance-associated macrophage protein 2) ELISA Kit可溶性CD21(CR2/sCD21)

溶藻弧菌磷化絲裂原活化蛋白激激1抗體Human INTS3(IntegRator complex subunit 3) ELISA Kit可溶性CD163分子(sCD163)

蟬花*磷化微管相關(guān)蛋白2抗體Human GLUD1(Glutamate dehydrogenase 1, mitochondrial) ELISA Kit可溶性CD146分子(sCD146)

哈茨木霉絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體Human GPX1(Glutathione peroxidase 1) ELISA Kit可溶性CD14(sCD14)

閃光須霉磷化絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體Human LPO(Lactoperoxidase) ELISA Kit可溶性CD105(sCD105)

腸炎沙門氏菌磷化絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體Human GLUD1(Glutamate dehydrogenase 1, mitochondrial) ELISA Kit可溶性CD100(sCD100)

海科貝特氏菌Cobetia│marina 質(zhì)量規(guī)格：95%,BR齊墩果

白地霉Geotrichum│candidum 質(zhì)量規(guī)格：1:3000,BR青藤堿

大腸埃希氏菌DH5α/797（797-PknB）Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：≥50 U/mg,sigma 原裝雙氫
核酸雜交漂洗液CGRP(Mouse calcitonin gene related peptide) ELISA Kit  小鼠降鈣su基因相關(guān)肽規(guī)格： 48T

MTL(Mouse Motilin) ELISA Kit  小鼠胃動(dòng)su規(guī)格： 48T

SS(Mouse Somatostatin) ELISA Kit  小鼠生長抑su規(guī)格： 48T

Fbg(Mouse Fibrinogen) ELISA Kit  小鼠血纖蛋白原規(guī)格： 48T

PAF(Mouse platelet activating factor) ELISA Kit  小鼠血小板活化因子規(guī)格： 48T