內(nèi)源性酶抑制劑公司正在銷售的產(chǎn)品：人內(nèi)皮型一氧化氮合酶(NOS3/eNOS)試劑盒Anti-MARCKS Antibody柯薩奇病 IgG Ⅰ(間接法二步法)
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人凝血因子X(F10)試劑

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

產(chǎn)品分類：免疫組化

儲存條件：室溫,12個月

用途：冰凍切片時,抑制內(nèi)源性酶(過氧化物酶)

注意事項：主要由抑制劑、防腐劑、PBS配制。

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

艾登短芽孢桿菌半乳糖神經(jīng)酰抗體Human XPA ELISA Kit雞白介8(IL-8)免疫試劑盒

節(jié)桿菌磷化葡萄糖合成1抗體Human YEATS2 ELISA Kit雞白介6受體(IL-6R)免疫試劑盒

雷州灣芽孢桿菌半乳糖凝集3抗體Human XPNPEP1 ELISA Kit雞白介6(IL-6)免疫試劑盒

亮白曲霉生長因子受體結(jié)合蛋白7抗體Human YOD1 ELISA Kit雞白介4(IL-4)免疫試劑盒

鞘單胞菌屬糖基轉(zhuǎn)移1結(jié)構(gòu)域1抗體Human YES1 ELISA Kit雞白介3(IL-3)免疫試劑盒

變異居白蟻菌G蛋白偶聯(lián)受體LGR7蛋白抗體Human XRCC5/Ku80(X-ray repair cross-complementing protein 5) ELISA Kit雞白介2(IL-2)免疫試劑盒

干酪乳桿菌G蛋白偶聯(lián)受體MRGX2蛋白抗體Human XRCC4 ELISA Kit雞白介1β(IL-1β)免疫試劑盒

少根根霉東京變種G蛋白偶聯(lián)受體RDC1蛋白抗體Human XRCC2 ELISA Kit雞白介18(IL-18)免疫試劑盒

類阿達青霉G蛋白偶聯(lián)受體TAS1R1蛋白抗體Human PDE1C(Calcium/calmodulin-dependent 3′,5′-cyclic nucleotide phosphodiesterase 1C) ELISA Kit雞白介17(IL-17)免疫試劑盒

膠孢G蛋白偶聯(lián)受體TGR7蛋白抗體Human XIAP(X-linked inhibitor of apoptosis ) ELISA Kit雞白介15(IL-15)免疫試劑盒

田菁根瘤菌G蛋白偶聯(lián)受體GPR157蛋白抗體Human XRN1 ELISA Kit雞白介12(IL-12/70)免疫試劑盒

橙黃色擲孢酵母G蛋白偶聯(lián)受體GPR176蛋白抗體Human XRN2 ELISA Kit雞白介10(IL-10)免疫試劑盒

嗜糖黃桿菌G蛋白偶聯(lián)受體GPR10蛋白抗體Human MTF1(Metal regulatory transcription factor 1) ELISA Kit雞白介1(IL-1)免疫試劑盒

皺褶假絲酵母G蛋白偶聯(lián)受體C5L2蛋白抗體Human XIRP2 ELISA Kit雞γ干擾(IFN-γ)免疫試劑盒

托魯斯山鏈霉菌G蛋白偶聯(lián)受體EX33蛋白抗體Human XYLT1 ELISA Kit雞β內(nèi)酰(β-lactamase)免疫試劑盒

鏈卵菌屬G蛋白偶聯(lián)受體GPR102蛋白抗體Human YME1L1 ELISA Kit雞β干擾(IFN-β/IFNB)免疫試劑盒

乳乳球菌乳亞種Lactococcus│lactis subsp. lactis 質(zhì)量規(guī)格：Viscosity Grade 10010-去乙酰紫杉;7-表-去乙酰基紫杉

黃海芽孢桿菌Bacillus│marisflavi 質(zhì)量規(guī)格：Viscosity Grade 150多烯紫杉

球形賴芽孢桿菌Lysinibacillus│sphaericus 質(zhì)量規(guī)格：0.97三尖杉寧堿
內(nèi)源性酶抑制劑D-LDH ELISA Kit   大鼠D-乳suan脫氫mei規(guī)格： 48T

TARC/CCL17 ELISA Kit  大鼠胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子規(guī)格： 48T

CH ELISA Kit  大鼠規(guī)格： 48T

TG ELISA Kit  大鼠甘油三酯規(guī)格： 48T

TG ELISA Kit(human)  人甘油三酯規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細胞類型，設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。