詳細介紹
公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
真菌保存液Ⅰ | 100ml | FS-R7109 |
產品分類:植物染色
儲存條件:室溫,避光,12個月
用途:用于液體浸制真菌標本的制作。一般真菌的保存推薦此液。
注意事項:主要由乙醇、福爾馬林等組成。
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。
炭黑曲霉9號染色體開放閱讀框174抗體Human HPX(Hemopexin) ELISA Kit人黑色瘤免疫試劑盒
大腸埃希氏菌6號染色體開放閱讀框64抗體Human TLR5(Toll-like receptor 5) ELISA Kit人黑色免疫試劑盒
類芽孢桿菌屬免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ抗體Human PRKACB(cAMP-dependent protein kinase catalytic subunit beta) ELISA Kit人核因子κB抑制物激β(IKK-β)免疫試劑盒
亞細亞菌屬透明質介導游走受體抗體Human ARRB2(Beta-arrestin-2) ELISA Kit人核因子κB抑制物激α(IKK-α)免疫試劑盒
東方伊薩酵母周期樣Y1抗體Human CNN1(Calponin-1) ELISA Kit人核因子κB(NF-κB)免疫試劑盒
根瘤菌周期J抗體Human ProHAMP(Hepcidin prohormone) ELISA Kit人核心結合因子α1,CBFA1/RUNX2 免疫試劑盒
青紫鏈霉菌周期L抗體Human MMP28(Matrix metalloproteinase-28) ELISA Kit人核心蛋白聚糖(DCN)免疫試劑盒
北方蜜環菌補體C1RL鏈多肽抗體Human CBS(Cystathionine beta-synthase) ELISA Kit人核糖體合成蛋白NSA2同源物(NSA2)免疫試劑盒
釀酒酵母周期M2抗體Human ADAMTS7(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 7) ELISA Kit人核糖體蛋白S9(RPS9)免疫試劑盒
鏈霉菌周期T2抗體Human EDA(Ectodysplasin-A) ELISA Kit人核糖體蛋白S25(RPS25)免疫試劑盒
白地霉周期K抗體Human TNC(Tenascin) ELISA Kit人核糖核抑止劑(RNH1/PRI/RNH)免疫試劑盒
天藍褐鏈霉菌抗菌肽CAMP抗體Human IL36A(Interleukin-36 alpha) ELISA Kit人核糖核,核糖核A家族,(肝臟,嗜性粒源性神經)(RNASE2)免疫試劑盒
釀酒酵母5號染色體開放閱讀框4抗體Human HPX(Hemopexin) ELISA Kit人核糖核(RNASE1/RIB1/RNS1)免疫試劑盒
大腸埃希菌4號染色體開放閱讀框44抗體Human MAPT(Microtubule-associated protein tau) ELISA Kit人核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)免疫試劑盒
膠孢4號染色體開放閱讀框33抗體Human TLR5(Toll-like receptor 5) ELISA Kit人核基質蛋白22(NMP-22)免疫試劑盒
pET-23a4號染色體開放閱讀框42抗體Human PRKACB(cAMP-dependent protein kinase catalytic subunit beta) ELISA Kit人核黃激(RFK)免疫試劑盒
Microsphaeropsis arundinisMicrosphaeropsis│arundinis 質量規格:IND紫蘇烯
缺陷短波單胞菌Brevundimonas│diminuta 質量規格:AR;IND苦蒿
立枯絲核菌Thanatephorus│cucumeris (A.B. Frank) Donk 質量規格:0.9西瑞香
真菌保存液ⅠHSP-20(Human Heat Shock Protein 20) ELISA Kit 人熱休克蛋白20規格: 48T
MYS(Human Myosin) ELISA Kit 人肌球蛋白規格: 48T
GS(Human Gelsolin) ELISA Kit 人凝溶膠蛋白規格: 48T
CRP(Human C-Reactive Protein) ELISA Kit 人C反應蛋白規格: 48T
ALD(Human aldosterone) ELISA Kit 人醛固tong規格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現,至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。
5) 之后更換正常培養基培養即可。