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產品分類：微生物染色

儲存條件：室溫,避光,6個月

用途：乙肝病毒染色的一種成分

注意事項：主要由地衣紅、去離子水組成。

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。

淺灰綠色鏈霉菌磷化α-連環蛋白抗體Human GADL1(Glutamate Decarboxylase Like Protein 1) ELISA Kit人葡萄糖6磷異構(GPI)免疫試劑盒

白肉迷孔菌周期E2抗體Human GAD-Ab(Anti-Glutamic Acid Decarboxylase antibody) ELISA Kit人葡萄糖6磷脫氫(G6PD)免疫試劑盒

印度毛殼磷化鈣/鈣調依賴蛋白激CAMK2B/D/G抗體Human GAL12(Galectin 12) ELISA Kit人葡萄糖-6-磷/葡萄糖-6-磷酯(G-6-Pase)免疫試劑盒

煙管菌腫瘤易感候選基因3抗體Human GAL8(Galectin 8) ELISA Kit人破傷風(Tetanus)抗體(IgG)免疫試劑盒

蘋果鏈格孢（蘋果斑點落葉病菌）磷化腫瘤易感候選基因3抗體Human GAL14(Galectin 14) ELISA Kit人蘋果脫氫1(MDH1)免疫試劑盒

貴州綠僵菌磷化CREB-1抗體Human GATA4(GATA Binding Protein 4) ELISA Kit人平滑肌肌動蛋白(SMA)免疫試劑盒

土曲霉磷化CREB-1抗體Human GARS(Glycyl tRNA Synthetase) ELISA Kit人核苷磷化(PNP)免疫試劑盒

溜曲霉磷化周期依賴性激6抗體Human GCLM(Glutamate Cysteine Ligase, Modifier Subunit) ELISA Kit人脾臟酪激(Syk)免疫試劑盒

尖枝革菌原癌基因CBL2抗體Human GCSFR(Colony Stimulating Factor Receptor, Granulocyte) ELISA Kit人皮質抑/皮質穩定蛋白(CORT)免疫試劑盒

短鏈諾氏菌磷化原癌基因CBL2抗體Human GDF3(Growth Differentiation Factor 3) ELISA Kit人皮質/腎上腺(CORT)免疫試劑盒

赤曲霉β鏈接相互作用蛋白1抗體Human fT3(Free Triiodothyronine) ELISA Kit人皮質-3(Cortxin-3)免疫試劑盒

臭紅菇磷化β鏈接相互作用蛋白1抗體Human GDF6(Growth Differentiation Factor 6) ELISA Kit人皮質類固結合球蛋白(CBG)免疫試劑盒

Pseudomonas fluorescens PfO-1磷化β 連環蛋白抗體Human GDH/GLDH(Glutamate dehydrogenase) ELISA Kit人皮質(Cortisol)免疫試劑盒

成團泛菌葉綠體蛋白抗體（植物）Human GDF7(Growth Differentiation Factor 7) ELISA Kit人皮膚淋巴相關抗原(CLA)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌磷化后期促進復合蛋白3抗體Human fT4(Free Thyroxine) ELISA Kit人皮膚蛋白(DPT)免疫試劑盒

放射形根瘤菌磷化絲切蛋白抗體Human FGα(Fibrinogen Alpha) ELISA Kit人皮動蛋白(CTTN)免疫試劑盒

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格：>98%,BSB淋巴抗原試劑盒次大風子

鴨疫里氏桿菌Riemerella│anatipestifer 質量規格：>98%,BRblca-4 次

: IOCM30資源名稱: 豇豆慢生根瘤菌 質量規格：>98%,BRblca-1 催吐蘿芙木定
地衣紅染色液vaspin(Human Visceral adipose-specific serine protease inhibitor) ELISA Kit  人內臟脂肪特異性絲氨suan蛋白mei抑制劑規格： 48T

PP(Human Protein Phosphatase) ELISA Kit  人蛋白磷suanmei規格： 48T

TrxR(Human thioredoxin reductase) ELISA Kit  人硫氧還蛋白還原mei規格： 48T

HLE(Human leukocyte exastase) ELISA Kit  人白細胞彈性蛋白mei規格： 48T

Human Elastase ELISA Kit  人彈性蛋白mei規格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。

5）   之后更換正常培養基培養即可。