焦亞硫酸鈉溶液公司正在銷售的產品：Anti-ZMYND8 Antibody人α谷胱甘肽S轉移酶
Anti-ZNF106 Antibody人谷胱甘肽過氧化物酶elisa試劑盒
Anti-ZNF134 Antibody人同型半胱
Anti-ZNF148 Antibody人游離脂肪酸
Anti-ZNF225 Antibody人骨粘連蛋白
Anti-ZNF174 Antibody人葉酸
Anti-ZNF1

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

產品分類：酶抑制劑

儲存條件：—20℃,避光 ,12個月

用途：蛋白酶抑制劑

注意事項：工作濃度0.1mmol/L

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。

禾谷鐮刀菌ras癌基因家族Rab3A--Rab3D抗體Anti-DDR2 Antibody早期生長應答因子3(EGR3)

根瘤菌鳥核苷交換因子rasgef1a抗體Anti-DDT Antibody早期生長應答因子2(EGR2)

樺褶孔菌胰腺癌轉移相關蛋白RLLM1抗體Anti-DDT Antibody早期生長應答因子1(EGR1)

枯草芽孢桿菌環指蛋白45/自分泌運動因子受體抗體Anti-DDX4 Antibody早期內體抗原1(EEA1)

相鄰小孔菌維甲相關孤兒受體α抗體Anti-DDX3X Antibody早期B-因子2(EBF2)

釀酒酵母維甲相關孤兒受體γ抗體Anti-DDX1 Antibody早期B-因子1(EBF1)

孔狀短小莖點霉癌基因RAS相關蛋白Rab4A抗體Anti-DDX4 Antibody早老2(PS2)

香菇ATP調節離子通道ROM K抗體Anti-DDX4 Antibody早老1(PSEN1)

黑青霉ras基因相關蛋白Rab24抗體Anti-DDX5 Antibody再生胰島衍生蛋白3γ(REG3γ)

固氮野野村氏菌視黃脫氫10抗體Anti-DDX5 Antibody再生胰島衍生蛋白3α(REG3α)

異型薄孔菌Ras蛋白腦組織同源類似物RHEB蛋白抗體Anti-DDX6 Antibody再生胰島衍生蛋白1β(REG1β)

桔橙小單孢菌原癌基因相關蛋白RAP2B抗體Anti-DDX5 Antibody再生蛋白1(NEO1)

禾谷鐮刀菌視網膜母瘤結合蛋白5抗體Anti-DEFB1 Antibody載脂蛋白O(APOO)

釀酒酵母Rho相關蛋白激2抗體Anti-DDX58 Antibody載脂蛋白M(APOM)

盤長孢狀盤孢核糖核苷還原亞基R2抗體Anti-DEFA1 Antibody載脂蛋白L6(APOL6)

硝鹽還原海桿菌Runx3抗體Anti-DELE1 Antibody載脂蛋白L5(APOL5)

: 46(1960)資源名稱: 傷菌 質量規格：>98%,BR

IFO0206資源名稱: 釀酒酵母 質量規格：BR,>98%,油狀

木霉Trichoderma│piluliferum J. Webster & Rifai 質量規格：0.98
焦亞硫酸鈉溶液ASPP1/FITC  熒光su標記p53凋亡刺激蛋白1IgG規格： 0.2ml

ASPP2/FITC  熒光su標記P53凋亡刺激蛋白2IgG規格： 0.2ml

AT/AGT /FITC  熒光su標記血管緊張su原IgG規格： 0.2ml

AT1/FITC  熒光su標記血管緊張suIIgG規格： 0.2ml

AT1R/FITC  熒光su標記血管緊張suⅡ-1型受體IgG規格： 0.2ml

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。

5）   之后更換正常培養基培養即可。