詳細介紹
商品介紹:
測定原理堿性條件下,蛋白質中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽鍵,能將Cu2+還原成Cu+;2分子的BCA與Cu+結合,生成紫色絡合物,在540-595nm有吸收峰,562nm處吸收峰*。 |
商品屬性:
產品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產品規格 | 50管/48樣 |
產品貨號 | AS6321371 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照組織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照組織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
枯草芽孢桿菌1號染色體開放閱讀框192抗體Human PEX2(Peroxisomal Biogenesis Factor 2) ELISA Kit人食欲/阿立新B(OX-B)免疫試劑盒
凍干補體1號染色體開放閱讀框194抗體Human PDE4D(Phosphodiesterase 4D, cAMP Specific) ELISA Kit人生長抑(SS)免疫試劑盒
澳型核果褐腐病菌1號染色體開放閱讀框198抗體Human PDIA2(Protein Disulfide Isomerase A2) ELISA Kit人生長激釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)免疫試劑盒
Paenibacillus1號染色體開放閱讀框21抗體Human PDIA3(Protein Disulfide Isomerase A3) ELISA Kit人生長激釋放多肽(GHRP)免疫試劑盒
大腸埃希菌1號染色體開放閱讀框216抗體Human PCDHβ16(Protocadherin Beta 16) ELISA Kit人生長激結合蛋白(P)免疫試劑盒
大腸埃希菌1號染色體開放閱讀框43抗體Human PCDHγA2(Protocadherin Gamma A2) ELISA Kit人生長激(GH)免疫試劑盒
大腸埃希菌1號染色體開放閱讀框50抗體Human PDIA5(Protein Disulfide Isomerase A5) ELISA Kit人生長分化因子-9(GDF-9)免疫試劑盒
黃硬皮馬勃1號染色體開放閱讀框49抗體Human PCI(Protein C Inhibitor) ELISA Kit人生長分化因子3(GDF3/UNQ222/PRO248)免疫試劑盒
柱孢綠僵菌1號染色體開放閱讀框53抗體Human PCIII(Procollagen III) ELISA Kit人生長分化因子2(GDF2)免疫試劑盒
麗胡枝子根瘤菌1號染色體開放閱讀框54抗體Human PDK4(Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 4) ELISA Kit人生長分化因子15(GDF15)免疫試劑盒
棉阿舒囊霉1號染色體開放閱讀框55抗體Human PDI(Protein Disulfide Isomerase) ELISA Kit人生長調節致癌基因α/黑瘤生激因子(GROα/CXCL1/MGSA)免疫試劑盒
綠色木霉1號染色體開放閱讀框56抗體Human PDIA6(Protein Disulfide Isomerase A6) ELISA Kit人腎小球組織糖基化終末產物(GTE-AGE)免疫試劑盒
大腸埃希菌1號染色體開放閱讀框65抗體Human PCNA(ProlifeRating Cell Nuclear Antigen) ELISA Kit人腎損傷分子1(Kim-1)免疫試劑盒
釀酒酵母1號染色體開放閱讀框64抗體Human ON(Osteonectin) ELISA Kit人腎前體免疫試劑盒
弓形蟲(GTS-2株)1號染色體開放閱讀框69抗體Human OTR(Oxytocin Receptor) ELISA Kit人腎(Renin)免疫試劑盒
灰樹花-41號染色體開放閱讀框77抗體Human NRG-2(Neuregulin 2) ELISA Kit人腎上腺髓質前體(Pro-ADM)免疫試劑盒
曲霉屬Aspergillus│sp. 質量規格:>98%,BCCD209分子試劑盒γ-倒捻子
大腸埃希菌Escherichia│coli 質量規格:>98%,BCCD19分子試劑盒扁豆堿
: NRRLB-24209=JCM12669=DSM44594資源名稱: Amycolatopsisdecaplanina 質量規格:>98%,BRCD15分子試劑盒冬凌草乙
BCA蛋白法含量測試盒50管/48樣山茶 馬尿酸鈉肌球蛋白輕鏈激Elisa
大腸埃希 5-己炔酸色羥化2Elisa
盤多毛孢屬 2,4,6-三苯肼胰島樣生長因子Elisa
食砜節桿 柯衣定蛋白ZElisa
松生莖點霉 Boc-4-甲氧基-L-苯CXC趨化因子配體12Elisa
煙管 4--3-硝苯抗凝血Elisa
大腸埃希氏 H-Sar-NH2·HCl5羥色2BElisa
果生鏈核盤 1,2-乙烷基二磺酸鈉Artemin蛋白Elisa
大腸埃希氏(大腸桿) 銀硬脂酰去飽和Elisa
弗氏假絲酵母 2,2'-二萘細小病抗體Elisa
耶特鏈霉 N-[(基硅)甲基]芐麻疹病Elisa
根瘤屬 1-(3-)哌瘟熱病Elisa
糖化酵母 3,3'-二基硫雜二羰花青化物父系表達基因2Elisa
類干酪乳桿 二(三-t-丁基膦)鈀(0)游離氨基酸Elisa
扶桑本森頓酵母 6-氨基富含半胱型酸性蛋白Elisa
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。