產(chǎn)品分類:染色其他
儲(chǔ)存條件:室溫,24個(gè)月
用途:主要用于軟化較堅(jiān)硬的材料如木質(zhì)化導(dǎo)管,使之容易切片。
注意事項(xiàng):主要由甘油、乙醇等組成。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購(gòu)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
甘油乙醇軟化劑 | 500ml | FS-R7187 |
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來(lái)水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定:
1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性
2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測(cè)器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái),保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來(lái)確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過(guò)建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來(lái)實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過(guò)夜;注:對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
米蘭農(nóng)霉菌胎球蛋白AHuman CDADC1 (Cytidine and dCMP deaminase domain-containing protein 1) ELISA KIT牛熱休克蛋白72(HSP-72)免疫試劑盒
墨西哥假黃色單胞菌叉頭蛋白L2抗體Human DMTF1 (Cyclin-D-binding Myb-like transcription factor 1) ELISA KIT牛熱休克蛋白70(HSP-70)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌叉頭相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子3抗體Human CCNYL1 (Cyclin-Y-like protein 1) ELISA KIT牛氧化(aldehyde oxidases,AO)免疫試劑盒
細(xì)黃鏈霉菌鐵蛋白抗體Human BSN(Protein bassoon) ELISA Kit牛固(ALD)免疫試劑盒
ChromohalobacterFMS樣酪激3配體抗體Human CCNYL2 (Cyclin-Y-like protein 2) ELISA KIT牛羥脂酰脫氫免疫試劑盒
宓花豆根瘤菌堿性成纖維生長(zhǎng)因子9抗體Human CCNYL3 (Putative cyclin-Y-like protein 3) ELISA KIT牛羥甲基戊二單酰(HMG-CoA)免疫試劑盒
塔賓曲霉原癌基因酪蛋白激FES抗體Human CRELD1 (Cysteine-rich with EGF-like domain protein 1) ELISA KIT牛羥脯(Hyp)免疫試劑盒
傘枝犁頭霉成纖維生長(zhǎng)因子16抗體Human CPLX2 (Complexin-2) ELISA KIT牛前列腺F2α(PGF2α)免疫試劑盒
柱形矛束霉成纖維激活蛋白α抗體Human CLK1 (Dual specificity protein kinase CLK1) ELISA KIT牛前列腺E2(PGE2)免疫試劑盒
水生恩氏菌Fas相關(guān)磷1抗體Human CYP3A5(Cytochrome P450 3A5) ELISA Kit牛葡萄糖激(GCK)免疫試劑盒
糞產(chǎn)堿桿菌葉受體4抗體Human CLPTM1 (Cleft lip and palate transmembrane protein 1 homolog) ELISA KIT牛葡萄糖6磷脫氫(G6PD)免疫試劑盒
科氏芽孢桿菌(可訂購(gòu))Wnt信號(hào)受體蛋白抗體Human CORIN (Atrial natriuretic peptide-converting enzyme) ELISA KIT牛皮質(zhì)(Cortisol)免疫試劑盒
樟疫霉磷化載脂蛋白A1抗體Human CLK3 (Dual specificity protein kinase CLK3) ELISA KITIIIA鏈(F13A1)免疫試劑盒
鏈格孢磷化載脂蛋白A1抗體Human CORT (Cortistatin) ELISA KIT牛凝血抗凝血Ⅲ復(fù)合物(TAT-III)免疫試劑盒
冬蟲(chóng)夏草(冬蟲(chóng)夏草菌,蝙蝠蛾被毛孢,中國(guó)被毛孢)磷化堿性成纖維生長(zhǎng)因子受體1抗體Human CLUL1 (Clusterin-like protein 1) ELISA KIT牛內(nèi)皮型一氧化氮合成(eNOS)免疫試劑盒
三葉草根瘤菌脂肪酰水解1抗體Human CD42(Cluster of Differentiation 42) ELISA Kit牛內(nèi)皮脂(EL)免疫試劑盒
人蒼白桿菌Ochrobactrum│anthropi 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5% (GC)L-纈
球孢白僵菌Beauveria│bassiana 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.8%(GC)腺苷
大腸埃希氏菌DH5α/pET30a/pheS+pheTEscherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC)維生K1
甘油乙醇軟化劑human frizzled homolog 8,FZD8 ELISA Kit 人卷曲蛋白8規(guī)格: 48T
human snail homolog 2,SNAI2 ELISA Kit 人蝸牛同源物2規(guī)格: 48T
Human golgi protein 73,GP-73 ELISA Kit 人高爾基蛋白73規(guī)格: 48T
Human TU3A Protein ELISA Kit 人TU3A蛋白規(guī)格: 48T
Human electron-transfer-flavoprotein beta polypeptide,ETFB ELISA Kit 人電子轉(zhuǎn)移黃su蛋白β肽規(guī)格: 48T