詳細介紹
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
干燥組織修復液 | 100ml | FS-R7189 |
產(chǎn)品分類:染色其他
儲存條件:4℃,12個月
用途:主要用于處理過程中干燥組織的修復,便于浸蠟等操作。
注意事項:主要由甘油、乙醇、硫酸鹽等組成。
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
青藍鏈霉菌彈性蛋白結(jié)合蛋白Fcn2抗體Human CCDC88A (Girdin) ELISA KIT牛結(jié)核桿菌(MTB)抗體(IgM)免疫試劑盒
假堅強芽孢桿菌范可綜合征相關蛋白FAN1抗體Human COL13A1 (Collagen alpha-1(XIII) chain) ELISA KIT牛結(jié)核桿菌(MTB)抗體(IgG)免疫試劑盒
釀酒酵母范可貧血組蛋白A抗體Human CRAMP1 (Protein cramped-like) ELISA KIT牛結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌卷曲蛋白3抗體Human FOXC2(Forkhead box protein C2) ELISA Kit牛窖蛋白Caveolin-1(CAV1)免疫試劑盒
Acinetobacter toroneri分裂周期樣蛋白20抗體Human COL13A1 (Collagen alpha-1(XIII) chain) ELISA KIT牛降鈣(CALCA/CALC)免疫試劑盒
蠟狀芽孢桿菌鐵氧化還原蛋白還原抗體Human CSF2RA (Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor receptor subunit alpha) ELISA KIT牛堿性成纖維生長因子/肝結(jié)合生長因子2(FGF2)免疫試劑盒
瓜類炭疽盤孢菌*磷化堿性成纖維生長因子受體1抗體Human CCDC88A (Girdin) ELISA KIT牛甲狀腺(T4)免疫試劑盒
湘坪鏈霉菌甲精結(jié)合蛋白17抗體Human CEP85 (Centrosomal protein of 85 kDa) ELISA KIT牛甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)免疫試劑盒
鹽地桿菌泛樣核糖體蛋白S30/MNSF-β抗體Human CINP (Cyclin-dependent kinase 2-interacting protein) ELISA KIT牛肌激同工MB(CK-MB)免疫試劑盒
胡椒枯萎病F-box蛋白2抗體Human CXCR6 (C-X-C chemokine receptor type 6) ELISA KIT牛肌激同工BB(CK-BB)免疫試劑盒
短小芽孢桿菌F-box蛋白45抗體Human DAB1(Disabled homolog 1) ELISA Kit牛活化A(ACV-A)免疫試劑盒
嗜鹽噬冷菌法基二磷合抗體Human CLCC1 (Chloride channel CLIC-like protein 1) ELISA KIT牛黃體生成(LH)免疫試劑盒
薛瓦酵母IgG-Fc片斷受體轉(zhuǎn)運蛋白α抗體Human CMKLR1 (Chemokine-like receptor 1) ELISA KIT牛(cAMP)免疫試劑盒
小孢擬盤多毛孢酰基合成4抗體Human CHKA (Choline kinase alpha) ELISA KIT牛環(huán)磷鳥苷(cGMP)免疫試劑盒
水稻節(jié)桿菌補體因子D抗體Human CDCA7L (Cell division cycle-associated 7-like protein) ELISA KIT牛核心蛋白聚糖(DCN)免疫試劑盒
膠孢補體因子I輕鏈抗體Human CGREF1 (Cell growth regulator with EF hand domain protein 1) ELISA KIT牛過氧化脂質(zhì)(LPO)免疫試劑盒
: HBUM82306資源名稱: 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC, ≥98.5% (GC)維生C
黑色鏈霉菌Streptomyces│niger 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,≥99%(GC)維生B6
木豆根瘤菌Rhizobium│sp. (Cajanus rhizabia) 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,≥99.5%(GC)維生B2
干燥組織修復液Human B-Cell Linker Protein,BLNK ELISA Kit 人B細胞連接蛋白規(guī)格: 48T
Human urease related protein C,UreC ELISA Kit 人尿sumei相關蛋白C規(guī)格: 48T
Human adaptor molecule apoptotic peptidase activating factor 1,APAF1 ELISA Kit 人銜接蛋白mei活化因子1規(guī)格: 48T
Human ankyrin B,Ank-B ELISA Kit 人錨蛋白B規(guī)格: 48T
Human latent membrane protein-1,LMP-1 ELISA Kit 人潛伏膜蛋白1規(guī)格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。