詳細介紹
公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
GUS染色液 | 50ml | FS-R7087 |
產品分類:植物染色
儲存條件:—20℃,避光,6個月
用途:用于轉基因植物的GUS基因表達的簡易檢測。
注意事項:染色原理是適宜的反應條件下,β-葡萄糖苷酶(GUS)可將X-Gluc水解成藍色物質,該物質不溶解于轉基因的細胞核組織中的靛藍物質,具有GUS活性的部位或位點呈現藍色或藍色斑點,可用肉眼或顯微鏡觀察到。
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。
Burkholderia metallica Vanlaere et al.促腎上腺皮質激釋放因子抗體Human S100A10(Protein S100-A10) ELISA Kit人抗網硬蛋白抗體(ARA)免疫試劑盒
泡盛曲霉5號染色體開放閱讀框54抗體Human PRNP(Major prion protein) ELISA Kit人抗外切體復合物成分RRP45(EXOSC9)抗體免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌CD93抗體Human EGFL7(Epidermal growth factor-like protein 7) ELISA Kit人抗外切體成分10(EXOSC10)抗體免疫試劑盒
假單胞菌嗜粒趨化蛋白CCL6抗體Human STAT5B(Signal transducer and activator of transcription 5B) ELISA Kit人抗唾液腺導管組織抗體(SDA)免疫試劑盒
大莖點菌6號染色體開放閱讀框81抗體Human EBI3(Interleukin-27 subunit beta) ELISA Kit人抗脫氧核糖核蛋白抗體(DNP-Ab)免疫試劑盒
仁果叢梗孢巨噬炎性蛋白1β抗體Human LILRA2(Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily A member 2) ELISA Kit人抗突觸前膜抗體(PsmAb)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌NK抑制性受體2DL4抗體Human EGFL7(Epidermal growth factor-like protein 7) ELISA Kit人抗突變型瓜波形蛋白抗體(anti-MCV Ab)免疫試劑盒
澳型核果褐腐病菌NK抑制性受體2DS4抗體Human LILRB1(Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 1) ELISA Kit人抗透明帶抗體(aZP)免疫試劑盒
橄欖色盤多毛孢NK抑制性受體3DL1抗體Human ATP2A3(Sarcoplasmic/endoplasmic reticulum calcium ATPase 3) ELISA Kit人抗天然脫氧核糖核抗體(n-DNA-Ab)免疫試劑盒
黑曲霉7號染色體開放閱讀框46抗體Human ECE1(Endothelin-converting enzyme 1) ELISA Kit人抗糖蛋白抗體(GP)免疫試劑盒
白地霉蛋白磷PP2A癌抑制蛋白抗體Human NDNF(Protein NDNF) ELISA Kit人抗肽酰基精脫亞4型(PADI4)抗體 免疫試劑盒
岸海桿狀菌巨噬甘露糖受體CD206抗體Human IFNA14(Interferon alpha-14) ELISA Kit人抗髓鞘少突膠質糖蛋白抗體(IgG)免疫試劑盒
淋巴衍生C-型凝集抗體Human C19orf10(UPF0556 protein C19orf10) ELISA Kit人抗髓磷脂相關糖蛋白(MAG)抗體免疫試劑盒
腸桿菌屬5號染色體開放閱讀框60抗體Human UBE3A(Ubiquitin-protein ligase E3A) ELISA Kit人抗髓磷脂抗體IgA(anti-myelin Ab)免疫試劑盒
霍氏腸桿菌CD44V5抗體Human PLA2G2A(Phospholipase A2, membrane associated) ELISA Kit人抗蘇酰基tRNA合成,線粒體(TARS2)抗體免疫試劑盒
尖孢鐮刀菌22號染色體開放閱讀框23抗體Human TNFRSF10B(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10B) ELISA Kit人抗蘇酰基tRNA合成,質(TARS)抗體免疫試劑盒
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格:用于液相色譜-質譜的離子對試劑Ⅱ型膠原試劑盒大戟因子L1
大腸埃希菌Escherichia│coli 質量規格:用于類的熒光離子對試劑Ⅱ型肺泡表面抗原試劑盒13-去羥基印烏堿
大腸埃希菌Escherichia│coli 質量規格:分析標準品,99.5%28S抗核糖體抗體試劑盒新知母皂苷BII
GUS染色液MPO(Human myeloperoxidase) ELISA Kit 人髓過氧化物mei規格: 48T
Gzms-B(Human granzymes B) ELISA Kit 人顆粒meiB規格: 48T
Gzms-A(Human granzymes A) ELISA Kit 人顆粒meiA規格: 48T
CIAP(Human Calf intestinal alkaline phosphatase) ELISA Kit 人牛小腸性磷suanmei規格: 48T
SOD(Human Super Oxidase Dimutase) ELISA Kit 人超氧化物歧化mei規格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現,至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。
5) 之后更換正常培養基培養即可。