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大鼠ELISA試劑盒實驗方法與步驟
閱讀:130 發(fā)布時間:2017-9-29提 供 商 | 上海撫生實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 35.6KB |
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大鼠ELISA試劑盒實驗方法與步驟
(1)環(huán)磷酰胺處理:取骨髓前24h先給小鼠腹腔注入環(huán)磷酰胺,注射劑量為100mg/kg動物體重。
(2)取骨髓:用損傷脊髓法處死小鼠,然后用剪刀剪開大腿上的皮膚和肌肉,取出大腿骨,用一小塊紗布來回搓干凈附在骨上的肌肉碎渣。剪掉股骨兩端膨大的關(guān)節(jié)頭,然后用注射器吸取5ml生理鹽水,插入股骨一端,將骨髓細胞沖洗至10ml的離心管中。可重復沖洗多次,直至骨髓腔呈白色為止。
(3)離心處理:將所獲得的細胞懸浮液以 1000rpm離心10min,吸去上清液,在沉淀物中加入2滴滅活的小牛血清,制成細胞懸液。
(4)涂片:滴一滴懸液于載玻片一端,按常規(guī)方法涂片,在空氣中晾干。
(5)固定:將晾干的載玻片放入甲醇固定液中10min,取出晾干。
(6)染色:將制片平放在玻璃板上,用1∶9∶10的 Giemsa∶PBS∶瑞氏染液,染色15min,流水沖洗后晾干即可鏡檢。
(7)觀察:嗜多染紅細胞為年幼紅細胞,呈灰藍色,略大于紅細胞(紅色),微核多呈圓形和橢圓形,呈藍紫色或紫紅色(圖13-3)。
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大鼠ELISA試劑盒