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肌紅蛋白(Mb)ELISA檢測試劑盒使用說明書

閱讀:647          發布時間:2017-1-18
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肌紅蛋白(Mb)ELISA檢測試劑盒標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
牛肌紅蛋白(Mb)ELISA試劑盒操作步驟
1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
4800ng/L5號標準品150µl的原倍標準品加入150µl標準品稀釋液
2400ng/L4號標準品150µl的5號標準品加入150µl標準品稀釋液
1200ng/L3號標準品150µl的4號標準品加入150µl標準品稀釋液
600ng/L2號標準品150µl的3號標準品加入150µl標準品稀釋液
300ng/L1號標準品150µl的2號標準品加入150µl標準品稀釋液
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40µl,然后再加待測樣品10µl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此
重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50µl,再加入顯色劑B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
10.終止:每孔加終止液50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.肌紅蛋白(Mb)ELISA檢測試劑盒測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
Tricine-SDS-PAGE 配膠液        遺傳霉素    100mg
Tricine-SDS-PAGE 配膠液        葡萄糖 -6- 磷酸脫氫酶    1000U
Tricine-SDS-PAGE 上樣液        D- 氨基半乳糖鹽酸鹽    250mg
Tricine-SDS-PAGE 上樣液        D- 半乳糖    25g
Tricine-SDS-PAGE 陽極電泳液 ( 干粉 )        D- 半乳糖醛酸    1g
Tricine-SDS-PAGE 陽極電泳液 ( 干粉 )        明膠    50g
Tricine-SDS-PAGE 陰極電泳液 ( 干粉 )        硫酸慶大霉素    500mg
Tricine-SDS-PAGE 陰極電泳液 ( 干粉 )        赤霉素    250mg
        谷氨酸脫氫酶    3000U
一站式蛋白質非變性 PAGE 套裝 ( 高 pH)        姬姆色素染料    1g
一站式蛋白質非變性 PAGE 套裝 ( 中 pH)        γ- 球蛋白 ( 牛血 )    1g
一站式蛋白質非變性 PAGE 套裝 ( 低 pH)        D- 氨基葡萄糖鹽酸鹽    10g
高 pH 緩沖液套裝        D- 無水葡萄糖    250g
中 pH 緩沖液套裝        葡萄糖氧化酶    10Ku
低 pH 緩沖液套裝        葡萄糖 -6- 磷酸二鈉    500mg
肌紅蛋白(Mb)ELISA檢測試劑盒

 

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