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組蛋白脫乙酰酶(HDAC1)檢測試劑盒使用說明書

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組蛋白脫乙酰酶(HDAC1)檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠叉頭蛋白P3(FOXP3)水平。用純化的小鼠叉頭蛋白P3(FOXP3)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入叉頭蛋白P3(FOXP3),再與HRP標(biāo)記的叉頭蛋白P3(FOXP3)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的叉頭蛋白P3(FOXP3)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠叉頭蛋白P3(FOXP3)濃度。
組蛋白脫乙酰酶(HDAC1)檢測試劑盒樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
氯化鎘 (2.5水)    英文名(EN):    Cadmium Chloride Hemi(Pentahydrate) (...    CAS No.:    7790-78-5    規(guī)格(SP):    100G    類別(Key):    通用試劑
麥汁瓊脂    英文名(EN):    Wort Agar    CAS No.:    Null    規(guī)格(SP):    500G    類別(Key):    通用試劑
DL-炔丙基甘氨酸    英文名(EN):    DL-Propargylglycine    CAS No.:    64165-64-6    規(guī)格(SP):    250MG原裝    類別(Key):    通用試劑
馬尿酰-組氨酰-亮氨酰    英文名(EN):    N-Hippuryl-His-Leu Hydrate (≥98%,HPLC)    CAS No.:    207386-83-2    規(guī)格(SP):    25MG    類別(Key):    通用試劑
D-纖維二糖    英文名(EN):    D-(+)-Cellobiose (≥99.0%,TLC)    CAS No.:    528-50-7    規(guī)格(SP):    5G    類別(Key):    通用試劑
蜜二糖    英文名(EN):    D-(+)-Melibiose (≥99.0%)    CAS No.:    585-99-9    規(guī)格(SP):    1G    類別(Key):    通用試劑
檸檬苦素    英文名(EN):    Limonin (>90%,HPLC)    CAS No.:    1180-71-8    規(guī)格(SP):    1MG    類別(Key):    通用試劑
25-羥膽固醇    英文名(EN):    25-Hydroxycholesterol (≥98%)    CAS No.:    2140-46-7    規(guī)格(SP):    10MG    類別(Key):    通用試劑
氫氧化銫    英文名(EN):    Cesium Hydroxide Hydrate (≥90%)    CAS No.:    12260-45-6    規(guī)格(SP):    5G    類別(Key):    通用試劑
TMB 二鹽酸鹽    英文名(EN):    TMB dihydrochloride (≥98%)    CAS No.:    207738-08-7    規(guī)格(SP):    250MG    類別(Key):    通用試劑
甲酸    英文名(EN):    Formic Acid (98%)    CAS No.:    64-18-6    規(guī)格(SP):    100ML    類別(Key):    通用試劑
七水硫酸鋅    英文名(EN):    Zinc Sulfate Heptahydrate (≥99.0%)    CAS No.:    7446-20-0    規(guī)格(SP):    100G    類別(Key):    通用試劑

組蛋白脫乙酰酶(HDAC1)檢測試劑盒

 

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