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組蛋白脫乙酰酶(HDAC1)檢測試劑盒使用說明書
閱讀:170 發(fā)布時(shí)間:2016-12-5提 供 商 | 上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 | 資料大小 | 17.3KB |
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組蛋白脫乙酰酶(HDAC1)檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠叉頭蛋白P3(FOXP3)水平。用純化的小鼠叉頭蛋白P3(FOXP3)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入叉頭蛋白P3(FOXP3),再與HRP標(biāo)記的叉頭蛋白P3(FOXP3)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的叉頭蛋白P3(FOXP3)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠叉頭蛋白P3(FOXP3)濃度。
組蛋白脫乙酰酶(HDAC1)檢測試劑盒樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
氯化鎘 (2.5水) 英文名(EN): Cadmium Chloride Hemi(Pentahydrate) (... CAS No.: 7790-78-5 規(guī)格(SP): 100G 類別(Key): 通用試劑
麥汁瓊脂 英文名(EN): Wort Agar CAS No.: Null 規(guī)格(SP): 500G 類別(Key): 通用試劑
DL-炔丙基甘氨酸 英文名(EN): DL-Propargylglycine CAS No.: 64165-64-6 規(guī)格(SP): 250MG原裝 類別(Key): 通用試劑
馬尿酰-組氨酰-亮氨酰 英文名(EN): N-Hippuryl-His-Leu Hydrate (≥98%,HPLC) CAS No.: 207386-83-2 規(guī)格(SP): 25MG 類別(Key): 通用試劑
D-纖維二糖 英文名(EN): D-(+)-Cellobiose (≥99.0%,TLC) CAS No.: 528-50-7 規(guī)格(SP): 5G 類別(Key): 通用試劑
蜜二糖 英文名(EN): D-(+)-Melibiose (≥99.0%) CAS No.: 585-99-9 規(guī)格(SP): 1G 類別(Key): 通用試劑
檸檬苦素 英文名(EN): Limonin (>90%,HPLC) CAS No.: 1180-71-8 規(guī)格(SP): 1MG 類別(Key): 通用試劑
25-羥膽固醇 英文名(EN): 25-Hydroxycholesterol (≥98%) CAS No.: 2140-46-7 規(guī)格(SP): 10MG 類別(Key): 通用試劑
氫氧化銫 英文名(EN): Cesium Hydroxide Hydrate (≥90%) CAS No.: 12260-45-6 規(guī)格(SP): 5G 類別(Key): 通用試劑
TMB 二鹽酸鹽 英文名(EN): TMB dihydrochloride (≥98%) CAS No.: 207738-08-7 規(guī)格(SP): 250MG 類別(Key): 通用試劑
甲酸 英文名(EN): Formic Acid (98%) CAS No.: 64-18-6 規(guī)格(SP): 100ML 類別(Key): 通用試劑
七水硫酸鋅 英文名(EN): Zinc Sulfate Heptahydrate (≥99.0%) CAS No.: 7446-20-0 規(guī)格(SP): 100G 類別(Key): 通用試劑
組蛋白脫乙酰酶(HDAC1)檢測試劑盒