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常染色體隱性遺傳性耳聾59蛋白ELISA試劑盒說明書
閱讀：84 發布時間：2015-4-1| 提 供 商 | 上海撫生實業有限公司 | 資料大小 | 142.7KB |
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常染色體隱性遺傳性耳聾59蛋白ELISA試劑盒說明書
本試劑僅供研究使用 標本：體液
常染色體隱性遺傳性耳聾59蛋白ELISA試劑盒說明書試驗原理：
BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知BFGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將BFGF和生物素標記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細胞生長因子ELISA 檢測試劑盒洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關系。
常染色體隱性遺傳性耳聾59蛋白ELISA試劑盒說明書自備材料
1．蒸餾水。
2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3．振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
1．避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2．實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
操作注意事項
1．試劑應按標簽儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
2．實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
3．不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6．洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7．底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8．加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9．按照中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
樣品收集、處理及保存方法
1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑的準備
標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。
2．洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。
操作步驟
1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。
2．根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。
3．加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
4．甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
5．每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6．甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
7．每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
8．取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。
9．在450nm波長處測定各孔的OD值。
局限
6號標準品以上的結果為非線性的，根據此標準曲線無法得到的結果。
性能
1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細胞因子反應。
3. 重復性：板內、板間變異系數均小于10%。
結果判斷與分析
1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的BFGF標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的BFGF含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
3、檢測值范圍：0-800pg/ml
4、敏感度： 1.0 pg/ml
PAI-1 兔子纖溶酶原激活物抑制因子1 規格： 48T/96T
PAI 兔子纖溶酶原激活物抑制因子 規格： 48T/96T
ICAM-3/CD50 兔子細胞間粘附分子3 規格： 48T/96T
ICAM-2/CD102 兔子細胞間粘附分子2 規格： 48T/96T
ICAM-1/CD54 兔子細胞間粘附分子1 規格： 48T/96T
DPD 兔子脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉 規格： 48T/96T
DHEA-S 兔子脫氫表雄酮硫酸酯 規格： 48T/96T
HA 兔子透明質酸 規格： 48T/96T
MBP 兔子髓磷脂堿性蛋白 規格： 48T/96T
RBP-4 兔子視黃醇結合蛋白4 規格： 48T/96T
GHRP 兔子生長激素釋放多肽 規格： 48T/96T
ADM 兔子腎上腺髓質素 規格： 48T/96T
NT-4 兔子神經營養因子4 規格： 48T/96T
NT-3 兔子神經營養因子3 規格： 48T/96T
NSE 兔子神經特異性烯醇化酶 規格： 48T/96T
NGF 兔子神經生長因子 規格： 48T/96T
GFAP 兔子神經膠質纖維酸性蛋白 規格： 48T/96T
PGE2 兔子前列腺素E2 規格： 48T/96T
PGE1 兔子前列腺素E1 規格： 48T/96T
GIP 兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽 規格： 48T/96T
CORT 兔子皮質酮/腎上腺酮 規格： 48T/96T
Cortisol 兔子皮質醇 規格： 48T/96T
FⅡ 兔子凝血因子Ⅱ 規格： 48T/96T
TR 兔子凝血酶受體 規格： 48T/96T
BNP 兔子腦鈉素/腦鈉尿肽 規格： 48T/96T
ES 兔子內皮抑素 規格： 48T/96T
eNOS-3 兔子內皮型一氧化氮合成酶3 規格： 48T/96T
ET-1 兔子內皮素1 規格： 48T/96T
ET-1 兔子內皮素1 規格： 48T/96T
IgM 兔子免疫球蛋白M 規格： 48T/96T
IgG 兔子免疫球蛋白G 規格： 48T/96T
IgE 兔子免疫球蛋白E 規格： 48T/96T
IgA 兔子免疫球蛋白A 規格： 48T/96T
Sam 兔子可溶性粘附分子 規格： 48T/96T
sVCAM-1 兔子可溶性血管細胞粘附分子1 規格： 48T/96T
sEPCR 兔子可溶性血管內皮細胞蛋白C受體 規格： 48T/96T
sICAM-1 兔子可溶性細胞間粘附分子1 規格： 48T/96T
sCD40L 兔子可溶性白細胞分化抗原40配體 規格： 48T/96T
sP-selectin 兔子可溶性P選擇素 規格： 48T/96T
sE-selectin 兔子可溶性E選擇素 規格： 48T/96T
ANGA 兔子抗中性粒細胞顆粒抗體 規格： 48T/96T
MIP-5 兔子巨噬細胞炎性蛋白5 規格： 48T/96T
MIP-1α/CCL3 兔子巨噬細胞炎性蛋白1α 規格： 48T/96T
Collagenase II 兔子膠原酶II 規格： 48T/96T
Collagenase I 兔子膠原酶I 規格： 48T/96T
bFGF 兔子堿性成纖維細胞生長因子 規格： 48T/96T
T4 兔子甲狀腺素 規格： 48T/96T
TIMP-1 兔子基質金屬蛋白酶抑制因子1 規格： 48T/96T
MMP-9 兔子基質金屬蛋白酶9 規格： 48T/96T
MMP-5 兔子基質金屬蛋白酶5 規格： 48T/96T
MMP-4 兔子基質金屬蛋白酶4 規格： 48T/96T
MMP-3 兔子基質金屬蛋白酶3 規格： 48T/96T
Cr 兔子骨膠原交聯 規格： 48T/96T
T 兔子睪酮 規格： 48T/96T
HGF 兔子肝細胞生長因子 規格： 48T/96T
TE 兔子端粒酶 規格： 48T/96T
CETP 兔子膽固醇酯轉移蛋白 規格： 48T/96T
MCP-1/CCL2/MCAF 兔子單核細胞趨化蛋白1 規格： 48T/96T
PRL 兔子催乳素 規格： 48T/96T
PRL 兔子催乳素 規格： 48T/96T
ACTH 兔子促腎上腺皮質激素 規格： 48T/96T
FSH 兔子促卵泡素 規格： 48T/96T
TSH 兔子促甲狀腺素 規格： 48T/96T
LH 兔子促黃體激素 規格： 48T/96T
LH 兔子促黃體激素 規格： 48T/96T
E2 兔子雌二醇 規格： 48T/96T
iFABP 兔子腸脂肪酸結合蛋白 規格： 48T/96T
C3a 兔子補體片斷3a 規格： 48T/96T
C4 兔子補體蛋白4 規格： 48T/96T
EGF 兔子表皮生長因子 規格： 48T/96T
LIFR 兔子白血病抑制因子受體 規格： 48T/96T
LTB4 兔子白三烯B4 規格： 48T/96T
IL-4 兔子白介素4 規格： 48T/96T
IL-3 兔子白介素3 規格： 48T/96T
IL-2 兔子白介素2 規格： 48T/96T
IL-1sR Ⅰ 兔子白介素1可溶性受體I 規格： 48T/96T
IL-1β 兔子白介素1β 規格： 48T/96T
IL-10 兔子白介素10 規格： 48T/96T
IL-1 兔子白介素1 規格： 48T/96T
IFN-γ 兔子γ干擾素 規格： 48T/96T
β-TG 兔子β血小板球蛋白/β血栓環蛋白 規格： 48T/96T
IFN-α 兔子α干擾素 規格： 48T/96T
S-100 兔子S100蛋白 規格： 48T/96T
S-100B 兔子S100B蛋白 規格： 48T/96T
E-Selectin/CD62E 兔子E選擇素 規格： 48T/96T
D2D 兔子D二聚體 規格： 48T/96T
CRP 兔子C反應蛋白 規格： 48T/96T
Bcl-2 兔子B細胞淋巴瘤因子2 規格： 48T/96T
PⅢNP 兔子Ⅲ型前膠原肽 規格： 48T/96T
PⅢNT 兔子Ⅲ型前膠原氨基端肽 規格： 48T/96T
Col Ⅲ 兔子Ⅲ型膠原 規格： 48T/96T
Col Ⅱ 兔子Ⅱ型膠原 規格： 48T/96T
PⅠCP 兔子Ⅰ型前膠原羧基端肽 規格： 48T/96T
Col Ⅰ 兔子Ⅰ型膠原 規格： 48T/96T
TGFβ2 兔轉化生長因子β2 規格： 48T/96T
MHCⅡ/RLAⅡ 兔主要組織相容性復合體Ⅱ類 規格： 48T/96T
MHCⅠ/RLAⅠ 兔主要組織相容性復合體Ⅰ類 規格： 48T/96T
Lp-α 兔脂蛋白α 規格： 48T/96T
Apo-E 兔載脂蛋白E 規格： 48T/96T
apo-B100 兔載脂蛋白B100 規格： 48T/96T
apo-A1 兔載脂蛋白A1 規格： 48T/96T
iNOS 兔誘導型一氧化氮合成酶 規格： 48T/96T
OSM 兔抑瘤素M 規格： 48T/96T
AChRab 兔乙酰膽堿受體抗體 規格： 48T/96T
ACh 兔乙酰膽堿 規格： 48T/96T