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腱調蛋白（TNMD）ELISA試劑盒說明書
閱讀：220 發布時間：2015-1-27| 提 供 商 | 上海撫生實業有限公司 | 資料大小 | 76KB |
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| 資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數 | 220次 |
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腱調蛋白(TNMD)ELISA試劑盒說明書
本試劑僅供研究使用 標本：體液
腱調蛋白(TNMD)ELISA試劑盒試驗原理：
BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知BFGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將BFGF和生物素標記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細胞生長因子ELISA 檢測試劑盒洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關系。
腱調蛋白(TNMD)ELISA試劑盒自備材料
1．蒸餾水。
2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3．振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
1．避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2．實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
腱調蛋白(TNMD)ELISA試劑盒操作注意事項
1．試劑應按標簽儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
2．實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
3．不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6．洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7．底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8．加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9．按照中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
腱調蛋白(TNMD)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法
1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑的準備
標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。
2．洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。
腱調蛋白(TNMD)ELISA試劑盒操作步驟
1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。
2．根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。
3．加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
4．甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
5．每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6．甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
7．每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
8．取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。
9．在450nm波長處測定各孔的OD值。
局限
6號標準品以上的結果為非線性的，根據此標準曲線無法得到的結果。
腱調蛋白(TNMD)ELISA試劑盒性能
1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細胞因子反應。
3. 重復性：板內、板間變異系數均小于10%。
腱調蛋白(TNMD)ELISA試劑盒結果判斷與分析
1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的BFGF標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的BFGF含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
3、檢測值范圍：0-800pg/ml
4、敏感度： 1.0 pg/ml
NADPH 小鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 規格： 48T/96T
PF-4/CXCL4 小鼠血小板因子4 規格： 48T/96T
PF-3 小鼠血小板因子3 規格： 48T/96T
PDGFsR-α 小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α 規格： 48T/96T
PDGF-BB 小鼠血小板衍生生長因子BB 規格： 48T/96T
PDGF-AB 小鼠血小板衍生生長因子AB 規格： 48T/96T
PDGF 小鼠血小板衍生生長因子 規格： 48T/96T
TPO 小鼠血小板生成素 規格： 48T/96T
GP-ⅡbⅢa 小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa 規格： 48T/96T
PAF 小鼠血小板活化因子 規格： 48T/96T
TSP-1 小鼠血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1 規格： 48T/96T
FDP 小鼠血纖蛋白原降解產物 規格： 48T/96T
Fbg 小鼠血纖蛋白原 規格： 48T/96T
TXB2 小鼠血栓素B2 規格： 48T/96T
TpP 小鼠血栓前體蛋白 規格： 48T/96T
TM 小鼠血栓調節蛋白 規格： 48T/96T
CH50 小鼠血清總補體 規格： 48T/96T
NO 小鼠血清一氧化氮 規格： 48T/96T
SAA 小鼠血清淀粉樣蛋白A 規格： 48T/96T
GMP-140 小鼠血漿α顆粒膜蛋白 規格： 48T/96T
HO-2 小鼠血紅素氧合酶2 規格： 48T/96T
HO-1 小鼠血紅素氧合酶1 規格： 48T/96T
vWF 小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子 規格： 48T/96T
BK 小鼠血管舒緩激肽 規格： 48T/96T
ANG-R-Tie2 小鼠血管生成素受體Tie2 規格： 48T/96T
ANG-R-Tie1 小鼠血管生成素受體Tie1 規格： 48T/96T
ANG-4 小鼠血管生成素4 規格： 48T/96T
ANG-2 小鼠血管生成素2 規格： 48T/96T
ANG-1 小鼠血管生成素1 規格： 48T/96T
ANG 小鼠血管生長素 規格： 48T/96T
VCAM-1/CD106 小鼠血管內皮細胞粘附分子1 規格： 48T/96T
VEGFR-3 小鼠血管內皮細胞生長因子受體-3 規格： 48T/96T
VEGFR-2 小鼠血管內皮細胞生長因子受體2 規格： 48T/96T
VEGFR-1 小鼠血管內皮細胞生長因子受體1 規格： 48T/96T
VEGF-D 小鼠血管內皮細胞生長因子D 規格： 48T/96T
VEGF-C 小鼠血管內皮細胞生長因子C 規格： 48T/96T
VEGF-B 小鼠血管內皮細胞生長因子B 規格： 48T/96T
VEGF 小鼠血管內皮細胞生長因子 規格： 48T/96T
ACE 小鼠血管緊張素轉化酶 規格： 48T/96T
aGT 小鼠血管緊張素原 規格： 48T/96T
ANG-Ⅱ 小鼠血管緊張素Ⅱ 規格： 48T/96T
Ang-Ⅰ 小鼠血管緊張素Ⅰ 規格： 48T/96T
VIP 小鼠血管活性腸肽 規格： 48T/96T
BrdU 小鼠溴脫氧核苷尿嘧啶 規格： 48T/96T