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撫生試劑-小鼠肺炎病毒（PVM）酶聯免疫 分析 試劑盒使用說明書
閱讀：143 發布時間：2014-5-16| 提 供 商 | 上海撫生實業有限公司 | 資料大小 | 3.1KB |
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| 資料類型 | JPG 圖片 | 瀏覽次數 | 143次 |
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小鼠肺炎病毒（PVM）酶聯免疫 分析
試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
使用目的：
96T
本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中肺炎病毒（PVM）表達。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠肺炎病毒（PVM）表達。用純化的小鼠肺炎病
毒（PVM）抗體包被微孔板，制成固相抗體，可與樣品中肺炎病毒（PVM）相結合，經洗
滌除去未結合的抗體和其他成分后再與 HRP 標記的肺炎病毒（PVM）抗體結合，形成抗體
抗原 酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化
成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度（OD 值），
與 CUTOFF 值相比較，從而判定標本中小鼠肺炎病毒（PVM）的存在與否。
試劑盒組成
1 30 倍濃縮洗滌液
2 酶標試劑
3 酶標包被板
4 樣品稀釋液
5 顯色劑 A 液
6 顯色劑 B 液
標本要求
20ml×1 瓶
6ml×1 瓶
12 孔×8 條
6ml×1 瓶
6ml×1 瓶
6ml×1/瓶
7 終止液
8 陽性對照
9 陰性對照
10 說明書
11 封板膜
12 密封袋
6ml×1 瓶
0.5ml×1 瓶
0.5ml×1 瓶
1 份
2 張
1 個
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗，可將標本放于20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1. 編號：將樣品對應微孔按序編號，每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1
孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）
2. 加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50!l。然后在待測樣品孔先
加樣品稀釋液 40!l，然后再加待測樣品 10!l。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不
觸及孔壁，輕輕晃動混勻，
3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此
重復 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑 50!l，空白孔除外。
7. 溫育：操作同 3。
8. 洗滌：操作同 5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50!l，再加入顯色劑 B50!l，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
10 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液 50!l，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白空調零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應在加終止
液后 15 分鐘以內進行。
操作程序總結：
計算和結果判定：
試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10
臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
陰性判定：樣品 OD 值< 臨界值（CUT OFF）者為肺炎病毒（PVM）陰性
陽性判定：樣品 OD 值≥ 臨界值（CUT OFF）者為肺炎病毒（PVM）陽性
。
注意事項
1．操作嚴格按照說明書進行，本試劑不同批號組分不得混用。
2．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 1530 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未
用完，板條應裝入密封袋中保存。
3．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
4． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5．底物請避光保存。
6．試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準，使用雙波長檢測時，參考波長為 630nm
7．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為 2M 的硫酸，使用時必須
注意安全。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；28℃。
2．有效期：6 個月
雞B因子(BF)ELISA試劑盒 Chicken factor B,BF ELISA試劑盒
雞5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒 Chicken 5-Nucleotidase,5-NT ELISA試劑盒
雞層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒 Chicken Laminin,LN ELISA試劑盒
雞17-酮類固醇(17-KS)ELISA試劑盒 Chicken 17-ketosteroids,17-KS ELISA試劑盒
雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒 Chicken N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG ELISA試劑盒
雞神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒 Chicken glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISA試劑盒
雞白介素17(IL-17)ELISA試劑盒 Chicken Interleukin 17,IL-17 ELISA試劑盒
雞1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA試劑盒 Chicken 1,3-βD glucosidase,1,3-βD-Glu ELISA試劑盒
雞可溶性血管內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒 Chicken soluble endothelial protein C receptor,sEPCR ELISA試劑盒
禽腦脊髓炎(AE)ELISA試劑盒 Avian encephalomyelitis,AE ELISA試劑盒
鴨白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒 Duck Interleukin-8,IL-8 ELISA試劑盒