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小鼠ELISA試劑盒技術(shù)基礎(chǔ)知識(shí)講解
酶免疫技術(shù)是以酶標(biāo)記的抗體或抗原為主要試劑的方法，是標(biāo)記免疫技術(shù)的一種。免疫技術(shù)是利用抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行的檢測(cè)方法，即應(yīng)用制備好的特異性抗原或抗體作為試劑，以檢測(cè)標(biāo)本中的相應(yīng)抗體或抗原。它的特點(diǎn)是具有高度的特異性和敏感性。如將抗原或抗體用可以微量檢測(cè)的標(biāo)記物（例如放射性核素、熒光素、酶等）進(jìn)行標(biāo)記，則在與標(biāo)本中的相應(yīng)抗體或抗原反應(yīng)后，可以不必測(cè)定抗原抗體復(fù)合物本身，而測(cè)定復(fù)合物中的標(biāo)記物，通過標(biāo)記物的放大作用，進(jìn)一步提高了免疫技術(shù)的敏感性。這種標(biāo)記免疫技術(shù)一般分為兩類，一類用于組織切片或其他標(biāo)本中抗原或抗體的定位；另一類用于液體標(biāo)本中抗原或抗體的測(cè)定。前者屬于免疫組化技術(shù)范疇，后者則稱為免疫測(cè)定。
酶免疫測(cè)定根據(jù)抗原抗體反應(yīng)后是否需要分離結(jié)合的與游離的酶標(biāo)記物而分為均相和異相兩種類型，實(shí)際上所有的標(biāo)記免疫測(cè)定均可分成這兩類。以標(biāo)記抗體檢測(cè)標(biāo)本中的抗原為例，按照簡(jiǎn)單的形式是在試劑抗體過量的情況下進(jìn)行，其反應(yīng)式如下：
Ab*Ag代表結(jié)合的標(biāo)記物， Ab*為游離的標(biāo)記物。如在抗原反應(yīng)后，先把Ab*Ag與Ab* 分離；然后測(cè)定Ab*Ag或Ab*中的標(biāo)記物的量，從而推算出標(biāo)本中的抗原量，這種方法稱為異相法。如在抗原抗體反應(yīng)后Ab*Ag中的標(biāo)記物* 失去其特性，例如酶失去其活力，熒光物質(zhì)不顯熒光，則不需要進(jìn)行Ab*Ag 與Ab*的分離，可以直接測(cè)定游離的Ab* 量，從而推算出標(biāo)本中的Ag含量，這種方法稱為均相法。
在異相法中，抗原和抗體如在液體中反應(yīng)，分離游離和結(jié)合的標(biāo)記物的方法有許多種。與放射免疫測(cè)定相類似的液相異相酶免疫技測(cè)定，在某些激素等定量測(cè)定中也有應(yīng)用。但常用的酶免疫測(cè)定法為固相酶免疫測(cè)定。其特點(diǎn)是將抗原或抗體制成固相制劑，這樣在與標(biāo)本中抗體或抗原反應(yīng)后，只需經(jīng)過固相的洗滌，就可以達(dá)到抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)的分離，大大簡(jiǎn)化了操作步驟。這種被稱為小鼠ELISA試劑盒EL1SA 的檢測(cè)技術(shù)成為目前臨床檢驗(yàn)中應(yīng)用較廣的免疫測(cè)定方法。
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