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人ELISA試劑盒雙抗原夾心法測(cè)抗體
反響辦法與雙抗體夾心法相似。
用特異性抗原進(jìn)行包被和制備酶聯(lián)絡(luò)物,以檢查相應(yīng)的抗體。與直接法測(cè)抗體的不一樣的地方為以酶標(biāo)抗原替代酶標(biāo)抗抗體。
此法中受檢標(biāo)本不需稀釋,可直接用于測(cè)定,因而其敏感度相對(duì)高于直接法。
乙肝標(biāo)志物中抗HBs的檢查常選用本法。
本法關(guān)鍵在于酶標(biāo)抗原的制備,應(yīng)根據(jù)抗原構(gòu)造的不一樣,尋找合適的符號(hào)辦法。
只需獲得對(duì)于受檢抗原的異性抗體,就可用于包被固相載體和制備酶聯(lián)絡(luò)物而樹(shù)立此法。
如抗體的來(lái)歷為抗血清,包被和酶標(biāo)用的抗體別離取自不一樣種屬的動(dòng)物。
如運(yùn)用單克隆抗體,通常挑選兩個(gè)對(duì)于抗原上不一樣決定簇的單抗,別離用于包被固相載體和制備酶聯(lián)絡(luò)物。
這種雙位點(diǎn)夾心法具有很高的特異性,而且能夠?qū)⑹軝z標(biāo)本和酶標(biāo)抗體一同保溫反響,作一步檢查。 
在一步法測(cè)定中,當(dāng)標(biāo)本中受檢抗原的含量很高時(shí),過(guò)量抗原別離和固相抗體及酶標(biāo)抗體聯(lián)絡(luò),而不再構(gòu)成"夾心復(fù)合物"。
用作雙抗體夾心法檢查的血清標(biāo)本中如富含RF,它可充任抗原成份,一同與固相抗體和酶標(biāo)抗體聯(lián)絡(luò),表現(xiàn)出假陽(yáng)性反響。
選用F(ab')或Fab片段作酶聯(lián)絡(luò)物的試劑,因?yàn)槿コ薋c段,然后消除RF的煩擾。
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