果蔬農(nóng)殘檢測(cè)儀器定期校正調(diào)試程序
果蔬農(nóng)殘檢測(cè)儀器原理是采用酶抑制法,在一定條件下。有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥能抑制膽堿酯酶的活性,其抑制率與農(nóng)藥的濃度星正相關(guān)11-21。在正常情況下,酶催化代謝產(chǎn)物水解。其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng),產(chǎn)生黃色物質(zhì),用分光光度計(jì)在410am處測(cè)定吸光度隨時(shí)間的變化值,計(jì)算出抑制率,通過(guò)抑制率的大小可以判斷樣品中是否有高劑量的有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。
果蔬農(nóng)殘檢測(cè)儀器定期校正調(diào)試、科學(xué)使用移液槍。選用250斗L和10斗L可調(diào)移液槍,將槍嘴先用清水沖洗再用純凈水沖洗,在電子天平上進(jìn)行吸液量校正。移液器使用時(shí),必須遵循器具原則:吸取酶、顯色劑、底物的移液器貼上標(biāo)簽,移取試劑時(shí)一一對(duì)應(yīng)使用。
檢測(cè)室溫度要控制在20—25℃,否則會(huì)影響酶的活性,影響結(jié)果刪。若完成對(duì)照測(cè)量后,儀器關(guān)機(jī)重啟,則需重新測(cè)量對(duì)照。進(jìn)行對(duì)照測(cè)量時(shí),1min后對(duì)照吸光度變化值應(yīng)在0.15以上,否則該酶試劑不能繼續(xù)使用。
樣液制備過(guò)程中,浸提要充分,縮短時(shí)間對(duì)結(jié)果影響較大。酶試劑和樣品液或緩沖液的混合液靜置反應(yīng)時(shí)間為10rain,反應(yīng)時(shí)間不同,結(jié)果不同。試劑從冰箱取出,先恢復(fù)至室溫,搖勻后再使用。酶、顯色劑和底物不能漏加或多加,否則對(duì)結(jié)果影響大。試劑使用時(shí),必須遵循只出不進(jìn)原則:從酶、顯色劑、底物試劑瓶中移取出的試劑。不得返回原試劑瓶中,以免污染原試劑151。若被測(cè)比色杯中有氣泡產(chǎn)生。應(yīng)排除。以免影響測(cè)量結(jié)果。
測(cè)量結(jié)果抑制率A%為”一一“,表示測(cè)量結(jié)果無(wú)效。可能由以下幾個(gè)原因造成:試劑從冰箱取出后,未恢復(fù)到室溫進(jìn)行對(duì)照測(cè)試;對(duì)照測(cè)試時(shí)間與樣品測(cè)試時(shí)間相隔太久。導(dǎo)致光照與樣品測(cè)試溫度條件相差較大;被測(cè)樣品色素干擾較嚴(yán)重;反應(yīng)試劑取用量是否準(zhǔn)確。另外,其他非測(cè)試孔空白的孔位可能也會(huì)出現(xiàn)”~一“㈣。儀器操作時(shí),注意托盤(pán)上的孔位不能有頭發(fā)、棉絲等其他異物,如有污物或液體可用過(guò)濾紙擦干凈,以免影響光路測(cè)量。應(yīng)做好抽樣單、檢測(cè)結(jié)果等原始記錄的整理并保存好。
抑制率≥50%的樣品,至少要重復(fù)檢測(cè)2次。才能確定此樣品是否合格。蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、蘑菇及番茄汁液中,含有對(duì)酶有影響的植物次生物質(zhì),容易產(chǎn)生假磷類農(nóng)藥的樣品5個(gè),檢出率為6.3%。檢出農(nóng)藥為乙酰甲胺磷、毒死蜱、三唑磷、氧化樂(lè)果。