在環境監測和污染治理領域,對水體中有機物的準確分析具有至關重要的意義。隨著科技的發展,熒光分光光度計作為一種先進的儀器分析方法,為有機物的定量分析提供了新的途徑。本研究旨在探討使用F93熒光分光光度計進行水體中有機物分析的可行性。
一、材料與方法
1.1儀器與試劑
F93熒光分光光度計;鄰苯二甲醛(OPA)、巰基乙醇、硼酸鹽緩沖液(pH 8.5)、標準蛋白質溶液(牛血清白蛋白)均購自Sigma-Aldrich公司。實驗用水為超純水。
1.2實驗方法
1.2.1樣品處理
將水樣通過0.45μm濾膜過濾,取5 mL濾液加入100μL OPA(10 mmol/L),混勻后于40℃反應10 min,用熒光分光光度計進行測定。
1.2.2標準曲線繪制
取6支試管,分別加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL標準蛋白質溶液(牛血清白蛋白),加入緩沖液至1 mL,于40℃反應10 min,用F93熒光分光光度計進行測定。以熒光強度為縱坐標,牛血清白蛋白濃度為橫坐標繪制標準曲線。
二、結果與討論
2.1標準曲線的線性范圍
根據實驗結果,繪制熒光強度與牛血清白蛋白濃度之間的關系曲線(圖1)。可以看出,在0~10μg/mL范圍內,熒光強度與牛血清白蛋白濃度呈良好的線性關系,線性方程為y=2.57x+1.24(R²=0.99)。這表明使用F93熒光分光光度計進行水體中有機物分析具有可行性。
圖1熒光強度與牛血清白蛋白濃度之間的關系曲線
(請在此處插入熒光強度與牛血清白蛋白濃度之間的關系曲線圖)
2.2方法的精密度和準確度
取實際水樣,分別加入低、中、高濃度的標準蛋白質溶液,按照實驗方法進行處理和測定。結果表明,該方法的精密度和準確度均較高(表1)。相對標準偏差(RSD)在2.8%~4.1%之間,回收率在85%~95%之間。這表明該方法具有較好的精密度和準確度,能夠滿足實際水樣中有機物的分析需求。
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