分子克隆和質粒載體構建服務
產品品牌:
分子克隆和質粒載體構建服務|實驗技術服務
測序實驗流程:
分子克隆的相關載體: DNA的片段的克隆需要合適的載體,載體或是質粒,或是噬菌體,或是病毒,通常大多經過人工改造。作為載體必須具備兩條件:-是該載體在細胞內必須能自主復制, 即必須具備復制原點;二是該載體必須具備適合的酶切位點,且這些酶切位點不在復制原點區域內。以上兩條,保證了載體的可繁殖性和可利用性。為了便于獲得陽隆克隆,載體上常有篩選標記,如對抗菌素的抗性,某些基因產物的顯色反應等。
服務要求:
1、請以郵件、文字等形式告知我們服務的主要目的及具體要求。
2、提供外源DNA的來源及背景資料。DNA來源包括: PCR擴增產物; RT - PCR擴增產物;從其它質粒上酶切得到的DNA的片段等。
3、提供DNA的片段的電泳照片,并請標明Marker有濃度。
4、提供載體來源與背景資料。
5、注明克隆使用的酶切位點以及是否需要平端連接等。
相關材料說明:
1、對于實驗材料中涉及病原體等危險材料不接受。
2、實驗中涉及的堿基序列請以郵件的形式發到我中心。
3、實驗中的使用載體要盡量提供背景資料: (質粒大小, 抗性,拷貝數,多克隆位點等)如果是商品化載體,請您提供生產廠家及標準名稱;如果所提供載體是您自己構建的請注明大體結構情況。
4、我中心可以提供常用的如(氨芐青霉素,氯霉素,卡那霉素)以外的抗生素需您提供。
5、您自己提供的引物如果為干品,請您標注具體的OD數,如果是液體態,請您標明濃度。
6、可以用甘油菌和穿刺菌形式郵寄菌體。
(建議同時提供相應的質粒) ;如果提供質粒,則質粒的量建議在4ug以上;如果提供的是PCR產物,則PCR產物量建議在5u以上(附上電泳圖)
- 用于提取RNA/DNA的材料要新鮮。采樣時應首先在液氮中速凍,保存在- 80度的冰箱中,使用干冰運輸。
結果提供:
1、相關的實驗說明和相關的酶切圖片。
2、測序的結果。
3、構建好的載體和菌液各-份。
4、如有鑒定的客戶提供PCR鑒定圖片。
實驗代做服務:
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