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植物類黃酮含量檢測(cè)試劑盒說明書
規(guī)格:100T/48S
類黃酮是一類多苯化合物,屬于植物次生代謝物,對(duì)人體具有消炎,抗菌,降血脂,清除體內(nèi)羥自由基,預(yù)防癌癥等作用。
天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96 孔板、蒸餾水。
一、測(cè)定操作表
1、 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 470nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 操作表
| 對(duì)照管 | 測(cè)定管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 空白管 |
樣本待測(cè)液(µL) | 60 | 60 |
|
|
標(biāo)準(zhǔn)溶液(μL) |
|
| 60 |
|
蒸餾水(μL) |
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| 60 |
試劑一(µL) | 15 | 15 | 15 | 15 |
混勻,室溫靜置 5min | ||||
試劑二(µL) |
| 15 | 15 | 15 |
混勻,室溫靜置 5min | ||||
試劑三(µL) | 120 | 120 | 120 | 120 |
60%乙醇(µL) | 105 | 90 | 90 | 90 |
混勻,37℃水浴 45 min,10000g,10min 離心取上清,取 200µL 于微量玻璃比色皿/96 孔板中測(cè)定 A470。計(jì)算ΔA=A 測(cè)定-A 對(duì)照,ΔAˊ=A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白。 |
1、 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
以單寧酸濃度為橫坐標(biāo),ΔAˊ為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線 y=kx+b,將ΔA 帶入方程求得 x; 2、 按樣本鮮重計(jì)算
類黃酮含量(mg/g 鮮重)= x×V 提取÷W=x÷W 3、 按樣本蛋白濃度計(jì)算
類黃酮含量(mg/ mg prot)= x×V 提取÷(Cpr×V 提取) = x÷Cpr
V 提取:加入提取液體積,1mL;W:樣本鮮重,g;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL。
1、 OD 值大于 0.4,樣品適當(dāng)稀釋再測(cè)定,注意計(jì)算公式里乘以稀釋倍數(shù)。
2、 顯色完成后立即測(cè)定,2 小時(shí)后吸光值會(huì)下降。
實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):
實(shí)驗(yàn)室代做實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目
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| 染色質(zhì)免疫沉淀分析(CLIP)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
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