移液器的工作原理是活塞通過彈簧的伸縮運動來實現吸液和放液。在活塞推動下，排出部分空氣，利用大氣壓吸入液體，再由活塞推動空氣排出液體。使用時，配合彈簧的伸縮性特點來操作，可以很好地控制移液的速度和力度。
移液器一個完整的移液循環，包括吸頭安裝——容量設定——吸液放液——卸去吸頭等步驟。各個步驟都需要遵循操作規范。
1、容量設定
從大體積調節至小體積時，逆時針旋轉至刻度即可；從小體積調節至大體積時，可先順時針調過設定體積，再回調至設定體積，可保證較佳的準確度。
不可將調節旋鈕旋出量程范圍外，否則會損壞移液器內機械裝置。
2、吸液和放液
吸液按鈕按至一檔，釋放按鈕，進行吸液。切記不能過快，否則液體進入吸頭過快會導致液體倒吸入移液器內部。
放液緊貼容器壁，先按到一檔，略作停頓，再按至二檔排除余液。
垂直吸液。
吸頭需浸入液面5mm，慢吸液體，達到預定體積后，在液面下停頓3秒，再離開液面。
吸液時緩慢松開控制器，否則液體進入吸頭過快會導致液體倒吸入移液器內部。
吸取揮發液體時，需潤洗吸頭4-6次，讓套筒室內的蒸汽飽和，可以避免產生漏液。
3、吸頭安裝
對于單道移液器，末端垂直插入吸頭，輕壓左右微微轉動即可上緊；
對于多道移液器，一道對準頭一個吸頭，傾斜插入，前后稍許搖動上緊即可。
不可反復撞擊移液器來確保吸頭氣密性，長期以這種方式裝配吸頭，會導致零部件因強烈撞擊而松散，甚至會導致調節刻度的旋鈕卡住。
4、正確放置
使用完畢，可以將其豎直掛在移液槍架上，但要小心別掉下來。當移液器頭里有液體時，切勿水平放置或倒置，以免液體倒流腐蝕活塞彈簧。
如不使用，要把移液槍的量程調至較大值的刻度，使彈簧處于松弛狀態以保護彈簧。
