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美國abi7500pcr儀使用方法講解

時間:2020/2/9閱讀:6397
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美國abi7500pcr儀使用方法講解

Q:7500快速定量PCR儀可以使用0.2ml PCR反應(yīng)管或者96孔板嗎?

A:不可以,7500 快速定量PCR儀只支持0.1ml PCR反應(yīng)管或者96孔板

Q:如何監(jiān)控反應(yīng)體系是否有蒸發(fā)?

A:查看Rox信號是否在整個PCR過程中保持一致。在多組分圖譜界面,選擇單孔,如果Rox信號逐漸增高,代表樣品孔中有蒸發(fā)。如下圖所示:

Q:內(nèi)參基因與目標(biāo)基因是否需要在相同的反應(yīng)板上運行相對定量?

A:是,內(nèi)參基因必須和目標(biāo)基因在相同的反應(yīng)板上。軟件可以根據(jù)在相同反應(yīng)板上的內(nèi)參基因和目標(biāo)基因自動進行相對定量計算,并計算估值區(qū)間。

Q:定量PCR系統(tǒng)支持的熒光染料有哪些?

A:下面是實時定量PCR儀器能夠檢測染料的表:

DYE

7300

7500

7900

Cy3™

 

X

 

Cy5™

 

X

 

FAM™

X

X

X

JOE™

X

X

X

NED™

X

X

X

ROX™

X

X

X

SYBR® Green I

X

X

X

TAMRA™

X

X

X

Texas Red®

 

X

 

TET™

 

 

X

VIC®

X

X

X

Q:用戶是否可以添加自定義染料?

A:可以,可以添加自定義染料,但染料的激發(fā)和發(fā)射波長必須與儀器的濾光片設(shè)置兼容。

Q:常用熒光染料的發(fā)射波長為多少?

A:

染料名稱

發(fā)射波長(nm)

FAM™

~520

SYBR® Green I

~520

TET™

~540

JOE™

~550

VIC®

~550

NED™

~580

CY3™

~580

TAMRA™

~580

ROX™

~610

Texas Red®

~610

CY5™

~670

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