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我司劉技術根據多年實驗經驗原創總結ELISA操作體會
閱讀:754 發布時間:2015-10-21昨日,我司技術部劉技術對公司銷售部全體員工召開培訓會議,會議主要內容就是培訓公司銷售員工掌握ELISA實驗的基本知識。引導客戶(尤其是實驗新手)取得實驗成功,達到客戶預期的實驗效果。對于實驗初學者由于實驗經驗有限或多或少缺少ELISA實驗不可忽視的小竅門以及實驗中一定不能犯的錯誤。劉技術會議總結了一下幾點內容供公司內部人員學習也為廣大科研者服務。
1.選擇正確的計算模式,如果數據不符合直線回歸,就要用曲線回歸計算。根據吸光度繪制標準曲線一般可以用:
(1)酶標儀本身有曲線擬合,常為CUBIC SPLINE 擬合,只要安說明書輸入標準品的濃度和在酶標板中的位置就可以打出結果。
(2)可以用CurveExpert軟件進行擬合
(3)用SPSS軟件進行擬合
2.加樣器的使用,可調的使用前一定要復查加液量是否正確!
3.連續加樣器使用時要連續流暢,并不是加樣越慢越好!
4.注意吸頭是有差異的,加標準曲線時用一個吸頭,從低濃度向高濃度依次加樣,如果作復孔,那么要提前設計好,把一個濃度的全部加完再加高濃度的。每次加完一個濃度后,用吸水紙擦干吸頭的外壁并用力打出吸頭內的殘余液體。
5.加樣品時把樣品按8個一排排好,做時每加樣一個,就把它前移一排,這樣不容易出錯。
6.注意酶標板的底部不要弄臟或劃傷,不要用手摸酶標板的底部。
7.注意按操作步驟計算試劑的量是否充足,注意有時按示例操作試劑根本不夠!!!
8.如果你要做很多樣本,需要兩板或以上的酶標板,注意把你的樣本安分組平分到各個板,以減少板間差。