技術文章
中科院胡老師反饋ELISA實驗問題已提交技術部處理
閱讀:923 發(fā)布時間:2015-12-9中國科學院高能物理研究所胡老師十月底在我司訂購了人Human(NGAL)elisa kit。昨日老師反應實驗已經做完,但是反應試劑盒除了滴加自帶的標準物孔顯色外,其他的加樣孔都沒有顯色。胡老師并說明了實驗樣本都是血清樣,其中部分樣本稀釋了一百倍,有幾個血清樣加了高濃度的NGAL。但實驗結果不顯色特我司技術出現這問題的可能原因?
經技術溝通交流后胡老師同意將剩余試劑盒試劑及樣本交由我司安排技術進行復測分析原因所在?,F我司已收到老師的剩余樣跟試劑,且已安排技術人員進行復測,并根據復測結果答復胡老師出現該情況的具體原因。
與此同時我司技術提出了如下的可能原因:
1.試劑已過效期,或不同試劑盒組分混用
2.錯加、漏加試劑底物、顯色劑 A或B。
3.洗板及加樣過程中,酶標受污染失活失去催化顯色劑顯色的能力。
4.終止液誤作洗滌液稀釋或當底物緩沖液配制。
5.蒸餾水有問題。
正確的解決對策
1.實驗前檢查試劑的組分及批號,確認未過期以及所有組分均屬對應的試劑盒。不同試劑盒或不同批號的試劑不能混用。
2.嚴格按說明書的步驟操作,加完試劑后可觀察一下液面高度是否一致,以減少漏加現象
3.確認盛酶標的容器不含酶抑制劑如疊氮鈉等,確認配制洗液的容器已洗干凈。
4.每次配制時都應看清標簽標明物質。
5.確認配制洗液的純化水達到要求且未污染,與好蒸餾水比較。